Ach 大鼠乙酰膽堿ELISA檢測(cè)試劑盒試劑配制
發(fā)表時(shí)間:2024-11-27
Ach 大鼠乙酰膽堿ELISA檢測(cè)試劑盒試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。在正式進(jìn)行Ach大鼠乙酰膽堿ELISA檢測(cè)前,還需進(jìn)行以下關(guān)鍵步驟以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和靈敏度:
11、洗滌液配制:將濃洗滌液按照1:25的比例與蒸餾水混合均勻,確保每孔洗滌時(shí)能有足夠的洗滌液覆蓋并徹底去除未結(jié)合的殘留物,此步驟對(duì)于減少背景噪音至關(guān)重要。
12、標(biāo)準(zhǔn)品系列稀釋?zhuān)簩善績(jī)龈蓸?biāo)準(zhǔn)品分別溶解于指定體積的樣品稀釋液中,并按照說(shuō)明書(shū)的推薦濃度梯度進(jìn)行系列稀釋?zhuān)越?biāo)準(zhǔn)曲線,便于后續(xù)樣本結(jié)果的定量分析。
13、抗體工作液準(zhǔn)備:取適量生物素標(biāo)記抗體和辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素,分別用其對(duì)應(yīng)的稀釋液按照1:100的比例稀釋至工作濃度,輕柔混勻,避免產(chǎn)生氣泡,影響加樣精度。
14、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將所有試劑(包括已稀釋的洗滌液、標(biāo)準(zhǔn)品系列、抗體工作液等)預(yù)熱至室溫,確保實(shí)驗(yàn)條件的一致性。同時(shí),檢查酶聯(lián)板無(wú)破損,孔間無(wú)污染,為接下來(lái)的加樣步驟做好準(zhǔn)備。
至此,Ach大鼠乙酰膽堿ELISA檢測(cè)試劑盒的所有試劑配制及準(zhǔn)備工作已完成,接下來(lái)即可按照說(shuō)明書(shū)指示的步驟進(jìn)行加樣、孵育、洗滌、顯色及終止反應(yīng)等操作,最終通過(guò)酶標(biāo)儀讀取數(shù)據(jù),進(jìn)行結(jié)果分析。