產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7281 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品僅供科研使用產(chǎn)品名稱:剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Toxophasma gondii
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
PCR實驗方法步驟:
剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2(1S,4R)鹽酸舍曲林質(zhì)量規(guī)格:美國進口(1S,4R) Sertraline Hydrochloride
HCAEC-c 人內(nèi)皮細(xì)胞(HCAEC) 500,000cells 滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)氨基他達那非質(zhì)量規(guī)格:美國進口Amino Tadalafil
視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鹽酸特拉唑嗪質(zhì)量規(guī)格:美國進口Terazosin hydrochloride
FSTL1 Others Mouse 小鼠 FSTL1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 2-芐基咪唑啉質(zhì)量規(guī)格:美國進口2-Benzylimidazoline
雜交瘤(B類);C3110D2B2氨基阿苯達唑砜質(zhì)量規(guī)格:美國進口Aminoalbendazole Sulfone
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-6 羊膜細(xì)胞,WISH細(xì)胞 786-O [786-0](腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞)瓊脂糖(美侖電泳級)質(zhì)量規(guī)格:美侖,電泳級Agarose
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0903瓊脂糖(Sigma)質(zhì)量規(guī)格:Sigma原裝Agarose
SPINK4 Others Human 人 SPINK4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 普拉洛芬質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRPranoprofen
CM-M064小鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL普拉洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>97%,標(biāo)準(zhǔn)品Pranoprofen
SPARCL1 Others Mouse 小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛血清白蛋白(BSA);牛血清白蛋白組分五質(zhì)量規(guī)格:Purity>98%,分子生物學(xué)級Albumin(bovine fraction V);BSA
FCGRT & B2M Others Rat 大鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 五氧化二鈳,英文名或英文縮寫:Niobium(V) oxide,級別:BR,45%,規(guī)格:500毫克
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL2-磺基苯酐 2-Sulfobenzoic anhydride,98% 1981-8-3 25G 通用試劑
GES-1人胃上皮細(xì)胞 Human gasic epithelial cell GES-1 1640+10% FBSLiChroCcRT@250-4
IFNA5 Protein Rat 重組大鼠 IFNA5 / IFNaG 蛋白 (His 標(biāo)簽)三鹽酸亞精胺shēng huà shì jì容量:25克
KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞()) 5×106cells/瓶×2 破桿菌/梭菌Closidium tetani535-11-52-溴乙酯;α-溴乙酯etxyl 2-broMopropionate;etxyl 2-broMopropanoate
剛地弓形蟲探針法熒光定量PCR試劑盒非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1GSK2636771GSK-2636771質(zhì)量規(guī)格:>97%,PI3Kβ選擇性抑制劑
IL17RD Others Human 人 IL17RD 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-葡糖糖-6-1酸二鈉二水D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
婆羅門牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-3丁二酸鈉(AR) succinate質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
MAG Others Human 人 MAG / GMA / Siglec-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 牛血紅蛋白Hemoglobin質(zhì)量規(guī)格:BR
膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL聚乙二醇10000PEG 10000質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000