產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP7440 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
產(chǎn)品僅供科研使用3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱:熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
人小細胞;NCI-H2227N',N-二甲基甘氨酸鹽酸鹽(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRN-N-Dimethylglycine hydrochloride
TACSTD2 Others Human 人 OP2 / TACSTD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 正壬基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCn-Nonyl-beta-D-maltopyranoside
山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1正辛基-beta-D-麥牙糖苷(>98% (HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BCn-Octyl-b-D-maltopyranoside
PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) 壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCNonyl β-D-glucopyranoside
HuTu-80 人十二指腸腺癌細胞N-芐基甘氨酸鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口N-Benzylglycine hydrochloride
OPM-2-UBC-EGFP(穩(wěn)定株)人細胞 OPM-2-UBC-EGFP (stable sain) human myeloma cell 1640+20% FBS(熱滅活)3-(*基硅基)-1-丙磺酸鈉(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T) 3-(Trimethylsilyl)-1-propanesulfonate
IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Ierleukin-17F 蛋白 (His 標(biāo)簽)二甲基硒(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)Dimethylselenide
人雪旺細胞 ( HSC) ( 5×105 ) 小鼠神經(jīng)干細胞 Mouse度他雄胺質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDutasteride
CM-H089人髂動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基100mL度他雄胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Dutasteride
IFNA13 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 人細胞裂解液 (陽性對照) 依達拉奉質(zhì)量規(guī)格:>98.5%Edaravone
中國倉鼠卵巢細胞;TPO-CHO-IL-SERINEL-絲酸美國藥典級25G56-45-1RT
HPX Others Human 人 HPX / Hemopexin 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-羧基醌 cNTHRcinoneONq-2-CcRBOXYLIC cCID 117-78-
EC109,人細胞Oleicacid順式-9-十八1酸1克AR,99%
CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) D-正纈酸10克RT
人胚肺二倍體細胞;KMB-17(直鏈淀粉)
熊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒COL9A1 Others Human 人 COL9A1 人細胞裂解液 (陽性對照) 托法替尼;CP-690550Tofacitinib(CP-690550,Tasocitinib) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,JAK3抑制劑
髓母細胞瘤組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)/1ml1-萘乙酸(NAA);α-萘乙酸1-Naphthylacetic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,Suitable for plant cell culture
SW13細胞,人腎上腺皮質(zhì)瘤 人癌細胞,BT-549細胞 溶液AMS3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)Indoxyl-Gal質(zhì)量規(guī)格:>98%(TLC),BR
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-73-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)已胺鹽(>98%(HPLC),BR)Indoxyl-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:>98%(HPLC),BR
IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人細胞裂解液 (陽性對照) 代苯(>98%,醫(yī)藥級)Iodobenzene質(zhì)量規(guī)格:>98%,醫(yī)藥級
操作流程:
產(chǎn)品僅供科研使用1. 整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。