產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1227 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):微內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱(chēng):微內(nèi)皮細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1227
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
微內(nèi)皮細(xì)胞 | E1227 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品:
月桂基基錄化,英文名或英文縮寫(xiě):DTAC,級(jí)別:高純,60%,規(guī)格:25克 CLIAKitforAZT(MouseAzidothymidine)ELISAKit小鼠疊氮胸苷規(guī)格:48T/96T
EE肉湯NA 線(xiàn)蟲(chóng)同步化生長(zhǎng)培養(yǎng)試劑盒10次
Benzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級(jí) RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
1,2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3 豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 ,英文名: EGF ELISA Kit
鉬 MolybdqnuM 7439-98-7 One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
新生霉素增菌肉湯shēng huà shì jì容量:100克 Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒人抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
PH緩沖溶液NA 組織檸檬酸合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
DL-絲酸100克 Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit人酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
月桂烯 Myrcene,≥90.0% 123-35-3 25ML 通用試劑 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
叔丁醇 litxium tqrt-butoxidq 1907-33-1 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒 Porcine IGF-1 ELISA Kit
四乙基錄化5克 HumanCompleme7,C7ELISA試劑盒人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(I型膠原酶) 組織BMK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
溶血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100克 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7 小鼠Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞序列1(MCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: MCL1 ELISA Kit
胞苷 99% Cytidinq 62-46-3 人鈣調(diào)酶(CaN)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T
微內(nèi)皮細(xì)胞匹馬霉素5克RT HumanAi-titinAibody,TTNELISAKit人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
620-23-5間甲基m-Tolualdehyde 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-CYSTEINExy7noCHLORIDE,ANxy7noUSL-半胱酸鹽酸鹽,無(wú)水高純級(jí)50G52-89-1RT 兔子金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒 Rabbit Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit
甲喹 Flumequine,≥98.0% 42835-25-6 1G 通用試劑 神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒 ,英文名: proNGF ELISA Kit
DL-賴(lài)安醋;(±)-2,6-二安基己醋 DL-Lysinq 70-24- PorcineIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒豬白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
微內(nèi)皮細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。