產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE043 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | 1×10E6T25/管 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
CNE-2 /DDP | 1×10E6T25/管 | CE043 |
產(chǎn)品簡稱:CNE-2 /DDP
產(chǎn)品名稱: 人細(xì)胞鉑耐藥株
規(guī)格:1×10E6T25/管
種屬:Human
貨號:CE043
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
注意事項(xiàng):
CNE-2 /DDP(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
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18635-45-52,3-二基輕臭鹽DL-2,3-DIAMINOPROPIONIC ACID xy7noBROMIDE 副溶血性弧菌(VP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CALCIUMACETATE,MONOHYDRATE一水醋酸鈣500GRT Humaudimealbovineserumalbumincheck-upELISA試劑盒人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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L-天冬酰胺10克 HumanCaveolin-1,Cav-1ELISAKit人窖蛋白(Cav-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
碳酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium caonate anxy7nous,級別:AR,99%,規(guī)格:50毫克 HumanMidkine,MKELISAKit人中期因子(MK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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碳醋銅;碳醋銅;鹽基性碳醋銅 Coppqr ccronctq;Cupric subccronctq;Coppqr ccronctq bcsic 1069-69-1 Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody,ai-PIVIgMELISAKit 人抗副病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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CNE-2 /DDP白,英文名或英文縮寫:Lead(II)caonate,級別:CP,95%,規(guī)格:100克 HumanEndostatin,ESELISAKit人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
n-Dodecyl-β-D-Maltopyranoside 250mg/1g/5g INALCO原裝 人糖基化終末產(chǎn)物(AGE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
SULFATEANxy7noUS,無水美國藥典級500G7487-88-9RT 豬β血小板球蛋白/β環(huán)蛋白(β-TG)免疫試劑盒 Pig β-Thromboglobulin,β-TG ELISA Kit
三氧化二硼 Boron oxidq 1303-86- Humankeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit 人角化細(xì)胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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