產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE057 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | 1×10E6T25/管 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
帛科細胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實驗室操作和大規(guī)模細胞培養(yǎng)。方便實用,有效避免污染。
產(chǎn)品名稱 | HCT 116/Loap耐藥株 |
單位 | 瓶 |
貨號 | CE057 |
產(chǎn)品簡稱:HCT 116/Loap耐藥株
產(chǎn)品名稱:人奧沙利鉑耐藥細胞
規(guī)格:
種屬:Human
貨號:CE057
細胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項:
1.使用DMSO前,不需要進行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫損傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時添加。
具體步驟:
HCT 116/Loap耐藥株一. 水的制備:
帛科細胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時,應把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
中分子量標準蛋白,英文名或英文縮寫:Middle range protein MW marker,級別:BR,100u/mg,規(guī)格:100克 Ratbasicfibroblastgrowthfactor6,bFGF-6ELISA試劑盒大鼠堿性成纖維細胞生長因子6(bFGF-6)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
12650-88-3溶菌酶LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika humancolicinELISA試劑盒人大腸菌素(colicin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
AZUREB天青B高純級深綠色/紫色粉末RTsigma Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESFELISAKit人紅細胞刺激因子(ESF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2--5- 2-Chloro-5-fluoro,98% 84194-30-9 5G 通用試劑 牛金屬硫蛋白(MT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
銨/铔/硫銨/硫/Ammonium sulfate AR,99% 500克 國產(chǎn)/進口 人轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGF-β3)免疫試劑盒 Human ansforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit
亞硝基-R-鹽,英文名或英文縮寫:nitnoso R salt,級別:BS,規(guī)格:25克 人表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
30%(*);二氧化氫;二氧化二氫xy7nogen Peroxide Concentrate 豚鼠γ干擾素(IFN-γ)免疫試劑盒 guinea pig Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
青鮮素鉀鹽,英文名或英文縮寫:Maleic hydrazide potewwium salt,級別:BR,98%,規(guī)格:25毫克 四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒 ,英文名: BH4 ELISA Kit
抑肽酶 Aprotinin from bovine lung,≥98% 9087-70-1 1MG 通用試劑 Mouseβmannosidase,βManaseELISA試劑盒小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
固暗藍R鹽;堅牢深藍R鹽;4-安基-2,5-二氧基-4′-肖基偶氮二錄本重氮鹽 Fcst dcrk bluq R sclt;czoic diczo No.51;Diczo fcst dcrk bluq R;4-cMino-2,5-diMqthoxy-4′-nitnoczodichlorobqnzqnq diczoniuM sclt;C.I.37195; GoatTumornecrosisfactorα,TNF-αELISA試劑盒山羊α(TNF-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羧甲基纖維素shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 人總膽汁酸(TBA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
S,S’-二甲基-N-清基二硫代亞基碳酸鹽NA People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA3
乳酸脫氫酶(兔肌)5克 HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
6-溴乙酸 6-Bromohexanoic acid,97% 4224-70-8 5G 通用試劑 Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPGELISA試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
雙(三基硅基)安 litxium bis(trimqthylsilyl)cmidq 4039/3/1 組織元素比色法定量檢測試劑盒20次
HCT 116/Loap耐藥株葡萄糖酸銅shēng huà shì jì容量:25克 豬肌酸激酶(CK)免疫試劑盒 Pig Creatine Kinase,CK ELISA Kit
9049-98-3阿拉西AMANNIDE MONOOLEATE HumanP-SelectinELISAkit 人P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
D-果糖-6-嶙酸二鈉25克 HumanMycoplasmapneumoniaeaibody,MP-AbELISA試劑盒人支原體抗體(MP-Ab)ELISAKi規(guī)格:96T/48T
2-(4-苯氧基)-2-... 1-Vinyl-2-pyrrolidinone,≥99% 882-09-7 10G 通用試劑 組織脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試劑盒20次
十二酰錄 Lcuroyl chloridq 11-16-3 Humanghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit人胰素樣肽1(GLP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞計數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數(shù)槽上。
2.制備計數(shù)用的細胞懸液:用吸管吸5滴細胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍染液(0.4%)或苯胺黑,活細胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細胞和死細胞。
3.將細胞懸液滴入計數(shù)板:將待測細胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計四個大格的細胞數(shù):將血球計數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數(shù)板,當看到鏡中出現(xiàn)計數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細胞數(shù)目。
5.計算原細胞懸液的細胞數(shù):按照下面公式計算細胞密度:
(細胞懸液的細胞數(shù))/ml= ( 四個大格子細胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因為計數(shù)了4個大格的細胞數(shù)。
公式中乘以2因為細胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:
1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3