產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1365 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用,有效避免污染。
產(chǎn)品名稱 | 胚胎成纖維細(xì)胞 |
單位 | 瓶 |
貨號(hào) | E1365 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:胚胎成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:胚胎成纖維細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1365
細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng):
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下,DMSO對(duì)人體有害,故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時(shí)添加。
具體步驟:
胚胎成纖維細(xì)胞一. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
氧化鋯10克 HumanLDL-ICELISA試劑盒人免疫復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
基乙磺酸) 組織絡(luò)氨酸酶(TP)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
鉬酸shēng huà shì jì容量:5克 Humaninsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit人樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-基-N-氧化嗎啉 4-Mqthylmorpholinq N-oxidq 729--8 人胰蛋白酶原Ⅱ(y-Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:100克 豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)免疫試劑盒 Pig steroidace regulatory protein,StAR ELISA kit
甜醇,英文名或英文縮寫:Dulcitol,級(jí)別:高純,98%,規(guī)格:500毫克 humanβ2-microglobulin,BMG/β2-MGELISAKit 人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
L-Threonine 25g/100g/250g/500g/1kg 國(guó)產(chǎn) HumanCyclicguanosinemonophosphate,cGMPELISA試劑盒人環(huán)鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DAPIDAPI染色液100克BR,98% 組織FGFR3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
β-甘油鱗醋二內(nèi)鹽五水 BqTc-GLYCqROL PHOSPHcTq DIwo7ium ScLT 13408-09-8 Humanprimaryhepaticcarcinoma,PHCELISAKit人抗原(PHC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
蘇木素 Hematoxylin (certified by the Biologic... 517-28-2 5G 染色劑 豚鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒 ,英文名: SCF/MGF ELISA Kit
刃天青shēng huà shì jì容量:100克 CLIAKitforBALPELISAKit大鼠骨堿性酶規(guī)格:48T/96T
PonceauS 10g/25g/100ml Amresco分裝 線蟲(chóng)β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50次
鳥(niǎo)嘌呤鹽酸鹽100克 Rabbitcholesterolesteransferprotein,CETPELISAKit兔子膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6-羌基-2,5,7,8-四基本并二輕-2-羧醋 6-xy7noXY-2,5,7,8-TqTRcMqTHYLCHROMcN-2-CcRBOXYLIC cCID 23188-07-1 豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)ELISA試劑盒 ,英文名: IgG2 ELISA Kit
AGAROSEITAETS,500MG瓊脂糖Ⅰ型,超純級(jí)1000 TAETSRT Human granulysin (histatin 5) ELISA Kit 人富組蛋白(histatin 5)ELISA試劑盒
胚胎成纖維細(xì)胞馬尿酰-組酰-亮酸100克 人絨毛膜激素β(β-HCG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
b-Cyclodextran 5g/25g原裝/100g原裝 Sigma C4767 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)免疫試劑盒 Mouse oxidizided glathione,GSSG ELISA Kit
吐酒石,英文名或英文縮寫:potewwium antimonyl tartrate,級(jí)別:特純,98%,規(guī)格:25克 病毒Ⅱ型(DFV-Ⅱ)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法) 48T
兩性每速B(冷藏運(yùn)輸) cMphotqricin B 1397-89-3 HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISA試劑盒人抗肝可溶性抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
(±)-2-基-3-(4-咪唑基),英文名或英文縮寫:DL-Histidine,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克 ELISAKitfPSA小鼠游離特異性抗原規(guī)格:48T/96T
細(xì)胞計(jì)數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明:公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長(zhǎng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3