產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK022 |
用途 | 公司產品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50 次 200 次 |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
操作流程:
1. 2×SYBR Green qPCR Mix試劑盒(含ROX) 根據要保存的各樣本的體積,計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應當是組織體積的10倍(如100mg組織約用1ml RNAwait);離心收集2×106細胞RNAwait的用量是1ml。
2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中;
3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀,立即完全浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入,組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織(如大鼠的、脾臟,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜(4℃過夜是必需的,這樣可使RNAwait完全滲入到組織中),然后轉移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃時仍為液態(tài),有結晶析出,是正常情況);或者在4℃冰箱過夜后,從RNAwait中取出組織塊,轉移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標本,反復凍融至室溫20次不影響RNA的質量。
參數規(guī)格:
產品名稱:2×SYBR Green qPCR Mix試劑盒(含ROX)
英文名稱:2×SYBR Green qPCR Mix(including ROX)
貨號:BK022
產品規(guī)格:50 次 200 次
產品有效期:一年
實驗要點:
1.CTAB 溶液在低于15℃時會析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預熱。
2.在最適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質,特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質變性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚和氯仿的混合液,可減輕這兩種現象,同時可加入適量的異戊醇(苯酚—氯仿—異戊醇=25:24:1),異戊醇的作用是消泡,并使蛋白質層緊密,使水相和有機相分層較好。 細菌的培養(yǎng)和收集 將含有質粒pBS 的DH5α菌種接種在LB 固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24 小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB 液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12 小時至對數生長后期。小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA 十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA 有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
◆分光光度計◆
分光光度計,又稱光譜儀(spectrometer),是將成分復雜的光,分解為光譜線的科學儀器。測量范圍一般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區(qū)和波長范圍為200~380 nm的紫外光區(qū)。不同的光源都有其特有的發(fā)射光譜,因此可采用不同的發(fā)光體作為儀器的光源。鎢燈的發(fā)射光譜:鎢燈光源所發(fā)出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續(xù)色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
◆電泳儀◆
電泳技術是分子生物學研究不可缺少的重要分析手段。所謂電泳,是指帶電粒子在電場中的運動,不同物質由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場中運動速度不同,根據這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組份分析或單個組份提取制備。
◆分析天平◆
分析天平是比臺秤更為精確的稱量儀器,可精確稱量至0.0001g (即0.1mg)以上。分析天平類型多種多樣,但其原理與使用方法基本相同。機械天平根據杠桿原理,當天平達平衡時,物體的質量即等于砝碼的質量;電子分析天平多采用電磁平衡方式,因稱出的是重量,需要校準來消除重力加速度的影響。
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