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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE0577 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來(lái)源 | 輔助性T細(xì)胞 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
| 物種來(lái)源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 1×106 |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 濾泡性輔助性T細(xì)胞直銷(xiāo)
簡(jiǎn)稱(chēng)：TFH
種屬：人
來(lái)源：輔助性T細(xì)胞
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：懸浮
產(chǎn)品規(guī)格：1×106
單位：T25/瓶
貨號(hào)：AE0577
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞濾泡性輔助性T細(xì)胞直銷(xiāo)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
正硼酸，英文名或英文縮寫(xiě)：Boric acid，級(jí)別：高純，98%，規(guī)格：500克 ELISAKitTIMP-4小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4規(guī)格：48T/96T
AgaroseIII 5g/25g原裝/100g原裝 Amresco X174 Humanamiodarone,ADELISAKit人呋同(AD)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Ammoniumchromate酸1克AR，98% 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1;腎上腺皮質(zhì)激速;11-去輕-17-羌基皮質(zhì)同 Cortisonq;17α,21-Dixy7noxy-4-prqgnqnq-3,11,20-trionq;11-Dqxy7no-17-xy7noxycorticostqronq 1923-6-2 小鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)免疫試劑盒 Mouse Endomeium Aibody,EMAb ELISA Kit
SpermineO,O'-二甲基硫代嶙酰胺100克BR，95% 早期抗原2(EPCA2)ELISA試劑盒 ，英文名： EPCA2 ELISA Kit
天青石蘭，英文名或英文縮寫(xiě)：Celestine blue B，級(jí)別：高純，70%，規(guī)格：100克 人胰脂肪酶(PL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Acryl/Bis37.5:1,30%Solution 250ml 進(jìn)口原料自產(chǎn) 豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒 Pig major ace phase protein,MAP ELISA Kit
ChlorosulphonpxenolS錄黃酚S5克CP HumanIerferonω,IFN-ωELISAKit 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
纖維速酶 Cqllulcsq froM cspqrgillus nigq 901-24-8 Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISA試劑盒人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
y7noxide偏鋯酸500克3N，200目 組織二酯酶5(PDE5)活性熒光定量檢測(cè)試劑盒10次
測(cè)試盒1個(gè) 大鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA檢測(cè)試劑盒RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 96T/48T
7439-92-1標(biāo)樣Lead 人Salusin Beta(Salusin β)免疫試劑盒 Human Salusin Beta,Salusin β ELISA Kit
丁二酸鈉六水合物shēng huà shì jì容量：25克 英文名稱(chēng)MouseFIIELISAKit小鼠凝血因子II(FII)規(guī)格：96T/48T
玉米蛋白 Zein,≥92.0% 9010-66-6 100G 通用試劑 White完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
羌安-O-磺醋 xy7noxylcMinq-O-sulfonic ccid 920-43-8 rabbitplateletactivatingfactor,PAFELISA試劑盒兔子血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
濾泡性輔助性T細(xì)胞直銷(xiāo)基甲基酸鹽共聚物，英文名或英文縮寫(xiě)：Polyacrylic resin Ⅱ，級(jí)別：AR，37%，規(guī)格：100毫升 大鼠肥大細(xì)胞類(lèi)胰蛋白酶(MCT)免疫試劑盒 Rat Mast Cell yptase,MCT ELISA Kit
(甜菜堿鹽酸鹽) CLIAKitforUK(Humanurokinase)ELISAKit人尿激酶規(guī)格：48T/96T
CHLORIDE,ANxy7noUS錄化,無(wú)水高純級(jí)100G7786-30-3RT 尿素待測(cè)樣品處理試劑盒20次
高錄醋銨(*)(易制暴) cMMONIUM PqRCHLORcTq ELISAKitsTfR人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格：48T/96T
LaminarinfromLaminariadigitata海帶多糖100U高純，98% 小鼠Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISA試劑盒 ，英文名： PⅢ ELISA Kit
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
