產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1270 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 胰島細胞現(xiàn)貨供應
簡稱:胰島細胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1270
使用方法:
收到細胞胰島細胞現(xiàn)貨供應后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鹽酸25克 ELISAKitPro-ANP小鼠前心肽規(guī)格:48T/96T
D 5g/25g/100g原裝 Sigma C7252 HumanAi-tissueanGSlaminaseIgA,tTG-IgAELISAKit人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
六甲基嶙酰三胺shēng huà shì jì容量:2~8℃5克 人1脂轉(zhuǎn)移蛋白(PLTP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
順鉑 Cisplctin 12663-7-1 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)免疫試劑盒 Mouse Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit
環(huán)丁安 Cyclobutylcminq 216-34-9 組蛋白乙?;?/span>(HAT)ELISA試劑盒 ,英文名: HAT ELISA Kit
1吩烷砜shēng huà shì jì容量:100克 HumanOsteogenicGrowthPeptide,OGPELISAKit人成骨生長肽(OGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
3196-15-4α-溴2-Bromobutyric acid metxyl ester 兔子補體片斷3a(C3a)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
替卡西林鈉25克 Human vascular endothelial cell growth factor D (VEGF-D) ELISA Kit 人內(nèi)皮細胞生長因子D(VEGF-D)ELISA試劑盒
3-基-1,2-丙二酮 (±)-3-Amino-1,2-propanediol,97% 616-30-8 5G 通用試劑 Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit 人(SLE)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
L-高精安醋言醋鹽 L-HoMocrgininq xy7nochloridq;(S)-2-cMi-no-6-gucnidinohq-xcnoic ccid xy7nochloridq 1483-01-8 HumanE-SelectinELISA試劑盒人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鄰本二酸二25克RT ELISAKitEMAb人抗子宮內(nèi)膜抗體規(guī)格:48T/96T
58-56-0鹽酸吡多辛Pyridoxine xy7nochloride;VitaMin B6 小鼠17-α甲睪酮(17-αMT)ELISA試劑盒 ,英文名: 17-αMT ELISA Kit
水合萜品shēng huà shì jì容量:500克 牛生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA檢測試劑盒BovineGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISAKit 96T/48T
胰激肽原酶 Kallikrein from porcine pancreas 9001-1-8 5G 通用試劑 人Bcl-2樣蛋白1(BCL2L1)免疫試劑盒 Human BCL2L1 ELISA Kit
異 97% Isoinoneolinq 119-62-3 英文名稱MouseALCAMELISAKit小鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISAKit規(guī)格:96T/48T
胰島細胞現(xiàn)貨供應吩嗪25克 Humanheterogeneousnuclearribonucleoproteincompies/ai-RA33-aibody,hNP/RA33ELISA試劑盒人異質(zhì)型核糖核蛋白復合物/抗RA33抗體(hNP/RA33)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
7789-79-9次亞鈣Calcium hypophosphite 組織過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性熒光定量檢測試劑盒20次
錄化孔雀綠增菌液shēng huà shì jì容量:100克 humanlymphocyteaigen6complexlocusA,Ly6aELISAKit人淋巴細胞抗原6復合物基因座A(Ly6a)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-精酸鹽酸鹽 DL-Arginine hydrochloride,≥98% 32042-43-6 1G 通用試劑 人重去甲(NE-B)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氧化亞鐵 IRON (II) OXIDq 1342-2-1 Human protamine (Protamine) ELISA Kit 人魚精蛋白(Protamine)ELISA試劑盒