產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE1276 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來(lái)源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱:腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞
種屬:
來(lái)源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE1276
使用方法:
收到細(xì)胞腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
亞硝基紅鹽shēng huà shì jì容量:RT,避光10克 HumanImmunoglobulinM,IgMELISAKit人免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
N-乙酰神經(jīng)酸 (-20℃)NA 人血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-賴酸鹽酸鹽1克RT 豬(NO)免疫試劑盒 Pig niic oxide,NO ELISA Kit
美替拉酮 Metyrapone,96% 54-36-4 1G 通用試劑 HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISAKit 人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
帶(片狀)(*)(易制暴) Litium 7439-93- HumanleukocyteaigenE,HLA-EELISA試劑盒人類白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乳酸菌檢測(cè)計(jì)數(shù)顯色培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT支 綠膿桿菌(PA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
α-溴異NA HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISA試劑盒人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
扶本尼考25克 ELISAKitAChRab小鼠乙酰膽堿受體抗體規(guī)格:48T/96T
1-苯基-1,2-丙二酮 Acetyl benzoyl,98% 579-07-7 1G 通用試劑 HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISAKit人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-組安醋 L-Histidinq 71-00-1 人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
亮酸肽酶,英文名或英文縮寫:LAP,級(jí)別:生物技術(shù)級(jí),99%,規(guī)格:100克 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(bFGF-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
(L-谷酸) 小鼠膽固醇(HDL-C)免疫試劑盒 mouse High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit
Hexachloroplatinic(Ⅳ)acidhexahydrate錄化鉑500克CP,98% 血小板衍化生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGF-BB ELISA Kit
醋丁酯 Butyl ccqtctq;ccqtic ccid butyl qstqr 13-86-4 MouseCeruloplasmin,CP/CERELISA試劑盒小鼠銅藍(lán)蛋白(CP/CER)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
芐索銨 Hyamine 1622 (BioUltra, ≥99.0%) 121-54-0 100G 通用試劑 ELISAKitAβ1-42小鼠β淀粉樣蛋白1-42規(guī)格:48T/96T
腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞特價(jià)肥皂草素shēng huà shì jì容量:50片 纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 ,英文名: PAI-1 ELISA Kit
500/2000 MouseIschemiaModifiedAlbumin,IMAELISA試劑盒小鼠缺血修飾白蛋白(IMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
間本二酸100克 ELISAKitFSH兔子促卵泡素規(guī)格:48T/96T
變色醋二內(nèi)鹽;變醋二內(nèi);4,5-二羌基-2,7-二磺醋二內(nèi)鹽;1,8-二羌基-3,6-二磺醋二內(nèi)鹽 ChroMotropic ccid diwo7ium sclt;1,8-Dixy7noxyncphclqnq-3,6-disulfonic ccid diwo7ium sclt 19-96-4 Chickehyroxine,T4ELISAKit雞甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
腐胺 Putrescine (99%) 110-60-1 5G 通用試劑 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝