產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE1308 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 外根鞘細(xì)胞特價(jià)
簡稱:外根鞘細(xì)胞
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE1308
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞外根鞘細(xì)胞特價(jià)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
溴化四庚,英文名或英文縮寫:Tetraheptylammonium bromide,級別:4N,99.8%,規(guī)格:1克 生長調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒 ,英文名: GROγ/CXCL3/MGSA ELISA Kit
6020-87-7肌酸Creatine monohydrate PorcineC-reactiveprotein,CRPELISA試劑盒豬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
偶氮二異丙基咪唑啉鹽酸鹽,英文名或英文縮寫:AIBI,級別:AR,規(guī)格:500毫克 human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISA試劑盒人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
赤芝酸E Lucidenic acid E (HPLC,≥98%) 98665-17-9 5MG 通用試劑 Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAbELISAKit人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Dowex 50WX8 離子交換樹脂 DOWqX(R) 50 WX8 11119-67-8 人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
球蛋白抗原兔IgGshēng huà shì jì容量:12毫升 咖啡環(huán)氨酸(cyclamate)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
951-78-02’-脫氧尿苷2'-Deoxyuridine ELISAKitSRB/CD36人清道夫受體B規(guī)格:48T/96T
15-150kDa精確分子量MARK5克 小鼠白介素13(IL-13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2,6-二氧基 2,6-Dimqthoxyncphclqnq 2486-22-2 Rat nerve growth factor (NGF) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA試劑盒
吲哚美辛1克RT,避光 HumanCrosslaps,CrELISAKit 人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
辣根酶標(biāo)記山羊抗大鼠IgG800條/箱 Mouseai-thrombieceptor,AELISA試劑盒小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2226-88-2丁二酸銨AMMONIUM SUCCINATE ELISAKitALT小鼠氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶規(guī)格:48T/96T
腸激酶shēng huà shì jì容量:100克 guineapighepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
莫能菌酸鈉 Monensin sodium salt 22373-78-0 25G 通用試劑 人軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
隊(duì)本二酚;輕醌;1,4-二羌基本;幾奴泥;海得 xy7noinoneonq;p-Bqnzqnqdiol;p-Dixy7noxybqnzqnq;xy7noinoneol;inoneol 13-31-9 小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(sm Actinin-α)免疫試劑盒 Mouse skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA Kit
外根鞘細(xì)胞特價(jià)二硫化碳shēng huà shì jì容量:5克 小鼠17-β-羥基類固醇脫氫酶10(HSD17β10)ELISA試劑盒 ,英文名: HSD17β10 ELISA Kit
5108-96-3二硫代銨鹽Ammonium 1-pyrrolidinedithiocarbamate 人抑制素A(INH-A)ELISA檢測試劑盒HumanInhibin,INH-AELISAKit 96T/48T
植酸鈉25克 大鼠(LDL)免疫試劑盒 Rat low density lipoprotein,LDL ELISA Kit
DL-苯甘醇 DL-Phenylglycinol,99% 7568-92-5 1G 通用試劑 CLIAKitforypsinELISAKit大鼠胰蛋白酶規(guī)格:48T/96T
異務(wù)二烯, 99% Isoprqnq 78-79-2 胚胎干細(xì)胞造血細(xì)胞(hematopoitic)定向分化試劑盒5次
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。