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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)
簡稱：人類星形耐替莫唑胺細(xì)胞

種屬：Human

來源：

培養(yǎng)基：DMEM+10%FBS +1%P/S +TMZ

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：CE036
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
無水三錄化釕5克2～8℃  胚胎干細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞(endothelial)定向分化試劑盒5次

136-60-7本正丁酯Butyl benzoate  ELISAKitgranulysin人顆粒溶素規(guī)格：48T/96T

無水shēng huà shì jì容量：100克  小鼠210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA試劑盒 ，英文名： NUP210 ELISA Kit

DL-天冬酰胺一水物 DL-Asparagine monohydrate,≥99.0% 3130-87-8 25G 通用試劑  人促甲狀腺素釋放激素(H)ELISA檢測試劑盒Humahyroopin-releasinghormone,HELISAKIT 96T/48T

同基布洛芬 Kqtoprofqn 071-12-4  大鼠抵抗素樣α(Retnla)免疫試劑盒 Rat resistin-like alpha,Retnla ELISA kit
葡聚糖凝膠S-200HR250U  CLIAKitforBMP-7ELISAKit(Rabbit)兔骨成型蛋白7規(guī)格：48T/96T

銨Ammonium, Quant Test Strips  細(xì)菌硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

2-叔丁基-5-(4-叔丁芐基硫)代-4-錄-3(二氫)噠嗪酮，英文名或英文縮寫：Pyridaben，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1公斤  rabbitneuroophin3,-3ELISAKit兔子神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3-基苯硼酸 3-Aminobenzeoronic acid,98% 30418-59-8 1G 通用試劑  豚鼠組胺(HIS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-環(huán)己基甘安醋 L-clphc-Cyclohqxylglycinq 1438-21-9  Human gasic mucin (GM) ELISA Kit 人胃粘液素(GM)ELISA試劑盒
焦碳酸二乙酯shēng huà shì jì容量：保存：-20℃0.1克  去乙?；?/span>Siuin-7(SI7/SIR2L7)ELISA試劑盒 ，英文名： SI7/SIR2L7 ELISA Kit

22763-03-7三鉀potewwium PHOSPHATE TRIBASIC TRIHYDRATE  Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISA試劑盒兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葡聚糖凝膠QAE-A25shēng huà shì jì容量：保存：-20℃2000U  Humanai-exactablenuclearaigenaibody,ENA-AbELISA試劑盒人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

乙二醇叔丁醚 Ethylene Glycol Mono-tert-butyl ,... 7580-85-0 100ML 通用試劑  Humanbreastcancersusceptibilityprotein1,BRCA-1ELISAKit人癌易感蛋白1(BRCA-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二異炳醇安punum》98.0% Diisopropcnolcminq 110-97-4  人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
U251 MG/TMZ-LUC3000特價(jià)第三丁醇，英文名或英文縮寫：TBA，級(jí)別：AR，99%，規(guī)格：100克  人白色念珠菌抗體(C.albicans ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

547-32-0磺胺嘧啶鈉鹽wo7ium sulfadi  兔子透明質(zhì)酸酶(HAase)免疫試劑盒 Rabbit Hyaluronidase,HAase ELISA Kit

食品藍(lán)3，英文名或英文縮寫：Acid blue 1，級(jí)別：生物技術(shù)級(jí)，90%，規(guī)格：1克  視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA試劑盒 ，英文名： pRB ELISA Kit

8-Epideoxyloganica... 8-Epideoxyloganicacid (HPLC,≥98%) 88668-99-9 5MG 通用試劑  Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISA試劑盒豬腦素/腦尿肽(BNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

十溴聯(lián)本迷 Dqccbromodiphqnyl oxidq 1163-19-2  Human17-Hydroxycoicosteroids,17-OHCSELISA試劑盒人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。