產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE062 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Mose |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: B82價(jià)格
簡稱:小鼠皮膚成纖維B82耐藥溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)
種屬:Mose
來源:
培養(yǎng)基:MEM+10%FBS+1%NEAA-1%NaP
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:貼壁
單位:
貨號:CE062
使用方法:
收到細(xì)胞B82價(jià)格后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
代本shēng huà shì jì容量:1公斤 人EJ抗體/抗甘酰NA合成酶抗體(EJ/GlyRS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7488-55-3亞錫Stannous sulfate 兔內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)免疫試劑盒 Rabbit Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA kit
金屬硫蛋白shēng huà shì jì容量:5克 羥甲基戊二酸單酰輔酶A(HMG-CoA)ELISA試劑盒 ,英文名: HMG-CoA ELISA Kit
烯丙基縮水 Allyl glycidyl ,≥99% 106-92-3 25ML 通用試劑 rabbitfollicle-stimulatinghormone,FSHELISA試劑盒兔子促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硼酸/Boric acid GR,99.8%, 500克 國產(chǎn)/進(jìn)口 humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
大黃酚,英文名或英文縮寫:Chrysophanic acid,級別:AR,99%,規(guī)格:100克 CLIAKitforBeta2-MGβ2-微球蛋白規(guī)格:48T/96T
(桿菌肽) 細(xì)菌乙酰甲基原醇V-P檢測試劑盒20次
NEUTRALRED,>90%中性紅高純級1G553-24-2RT rabbitFibrinogenDegradationProduct,FDPELISAKit兔子血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖淀分酶(+4℃) cMYLOGLUCOSIDcSq 903-08-0 豚鼠白介素15(IL15)ELISA試劑盒 ,英文名: IL15 ELISA Kit
MOPSwo7iumsalt3-(N-嗎啉)磺酸鈉5克BR,99% Human mannose binding protein / mannose binding lectin (MBP/MBL) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒
蟲膠shēng huà shì jì容量:1公斤 人D二聚體(D2D)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
392-56-3六扶本,99%HEXAFLUOROBENZENE 兔心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫試劑盒 Rabbit cardiac oponin Ⅰ,cTn-ⅠELISA Kit
酸鈉shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克 潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA試劑盒 ,英文名: LMP-1 ELISA Kit
鄰溴苯 2-Bromoanisole,97% 578-57-4 25G 通用試劑 RabbitGrowthHormoneReleasingPeptide,GHRPELISA試劑盒兔子生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
派洛寧Y/派洛寧G/焦寧Y/吡羅紅Y/吡羅紅G/Pyronin Y 超純 1克 國產(chǎn)/進(jìn)口 humanai-nucleosomeaibodyIgG,AnuA-IgGELISA試劑盒人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
B82價(jià)格橙黃G61公斤 Rat cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
(錄化鉀) HumanNandrolonePhenylpropionate,NPELISAKit 人苯諾龍/苯去甲睪酮(NP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
4-基-3-羥基-1-奈磺酸,英文名或英文縮寫:1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic acid,級別:2.5N,0.15mm×100mm,規(guī)格:5克 HumanconcanavalinA,ConAELISA試劑盒人刀A(ConA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
6B-羌基1 6BqTc-xy7noXYCORTISOL 3078-34-0 組織CDK5/P25激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
DL-3-羥基-n-,英文名或英文縮寫:3-xy7noxybutyric acid,級別:BR,規(guī)格:100克 HumanProteinase3Aibody,PR3AbELISAKit人蛋白酶3抗體(PR3Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T