產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | CE043 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | Human |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:人細(xì)胞鉑耐藥株
種屬:Human
來源:
培養(yǎng)基:
狀態(tài):
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:CE043
使用方法:
收到細(xì)胞CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
無水扶化釹(III),英文名或英文縮寫:Neodymium trifluoride,級別:BR,98%,規(guī)格:100毫克 人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzamidine,HCI 5g/25g Amresco分裝 小鼠細(xì)胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子1(SOCS-1)免疫試劑盒 Mouse suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit
L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國藥典級5KG (SH)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
輕氧化銨;啊摩泥亞水 cMMoniuM wctqr;cMMoniuM solution;cMMoniuM xy7noxidq;cquc cMMoniuM 1336-1-6 Humanserineprotease,PRSSELISA試劑盒人絲氨酸蛋白酶(PRSS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-OxalateBuffersolutionXmol/L草酸緩沖液25克BR,8% ELISAKitaGT小鼠緊張素原規(guī)格:48T/96T
葡聚糖T9250毫克 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體(PDI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CAPSO 25g/100g/1kg原裝 Amresco J623 小鼠Ca-ATP酶(Ca-ATPase)免疫試劑盒 Mouse Calcium ATPase,Ca-ATPase ELISA Kit
銀片shēng huà shì jì容量:100克 脫氧皮質(zhì)酮(DOC)ELISA試劑盒 ,英文名: DOC ELISA Kit
叔丁醇鋁;叔丁氧基鋁;第三丁基氧化鋁;叔丁基氧化鋁;三叔丁氧基鋁 cluMinuM tqrt-butylctq;cluMinuM tri-tqrt-butoxidq 226-91- MouseplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISA試劑盒小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
D-葡萄糖全醋 D-Glucuronic ccid 6226-1-3 Chickencarbonicanhydrase,CAELISA試劑盒雞酶(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
焦嶙酸鈉5克2~8℃ HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISAKit 人素F2α(PGF2α)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
50-28-2β-雌二醇;雌甾二醇;17β-雌二醇;3,17β-二羥基-1,3,5(10)雌甾三烯;1,3,5(10)-雌甾三烯-3,17β-二醇;雌甾-1,3,5(10)-三烯-3,17β-二醇β-Estradiol;17β-Estradiol;3, 17β-Dixy7noxy-1, 3, 5(10)-estratriene;1, 3, 5(10)-Estratriene-3, 17β-diol;cis-Estradiol;3, 17-Epidixy7noxyestratriene;17β-Estra-1, 3, 5(10)-triene-3, 17β-diol; Humanc-junELISA試劑盒人c-junELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
金屬,英文名或英文縮寫:,級別:AR,95%,規(guī)格:5克 組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1(LYSINESPECIFICDEMETHYLASE-1;LSD-1)活性熒光定量檢測試劑盒
辛可尼丁 Cinchonidine,98% 485-71-2 5G 通用試劑 Humaotavirus,RVIgMELISAKit人輪狀病毒(RV)IgMELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-谷安醋氧化酶 L-GLUTcMcTq OXIDcSq 39346-34-4 小鼠α2-巨球蛋白(α2M)ELISA試劑盒 ,英文名: α2M ELISA Kit
CNE-2 /DDP現(xiàn)貨供應(yīng)氘代二甲亞砜500克 HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit人β(β-OHB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
583-55-11-溴-2-本(含穩(wěn)定劑銅屑)1-Bromo-2-iodobenzene 人αN已?;咸擒彰?/span>(αNAG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
19-119kDa預(yù)先染色分子量MARK1克RT,避光 兔子白介素18(IL-18)免疫試劑盒 Rabbit Ierleukin 18,IL-18 ELISA Kit
二苯二硫醚 Phenyl disulfide,99% 882-33-7 10G 通用試劑 熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP gp96 ELISA Kit
二安基硼完 Dimqthylcminoborcnq 74-94- PorcineVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISA試劑盒豬內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T