產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3284 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
禽病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格 | Avian Herpesvirus 1(Gallid Herpesvirus1、GaHV1)1PCR | BKP3284 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:禽病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Tiamulin 中文名:泰妙菌素 分子式:C28H47NO4S 度:98.0% 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
Sulfadiazine 中文名:磺胺嘧啶 分子式:C10H10N4O2S 度:99.0% 小鼠氧化酶elisa試劑盒 小鼠氧化酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠氧化酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠氧化酶試劑盒、小鼠氧化酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Rifampicin 中文名:利福平 分子式:C43H58N4O12 度:96.5% 小鼠對(duì)基苯elisa試劑盒 小鼠對(duì)基苯試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠對(duì)基苯試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠對(duì)基苯試劑盒、小鼠對(duì)基苯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Dyphylline 中文名:二羥丙茶堿 分子式:C10H14N4O4 度:98.0% 小鼠蛋酸酶elisa試劑盒 小鼠蛋酸酶試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠蛋酸酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠蛋酸酶試劑盒、小鼠蛋酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Sulfamethazine 中文名:磺胺二甲嘧啶 分子式:C12H14N4O2S 度:99.0% 小鼠交聯(lián)物elisa試劑盒 小鼠交聯(lián)物試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠交聯(lián)物試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠交聯(lián)物試劑盒、小鼠交聯(lián)物eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Dihydrosenkyunolide C 195142-72-4 中文名:二氫洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H14O3 兔子細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glyceryl hexacosanoate 127098-14-0 中文名: 分子式:C29H58O4 Rat heme oxygenase 2 (HO-2) ELISA Kit 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒
Digalactosyldiacylglycerol 145033-48-3 中文名:雙半乳糖二酰甘油 分子式:C49H88O15 HumanProinsulin,PIELISAKit 人胰島素原(PI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
4-O-(3-nitropropanoyl)corollin 122475-42-7 中文名: 分子式:C18H24N4O18 HumanDeoxypyridinolinecrosslinks,DPDELISA試劑盒人脫氧膠原交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Senkyunolide G 94530-85-5 中文名:洋川芎內(nèi)酯G 分子式:C12H16O3 組織KSHV(KAPOSISARCOMA-ASSOCIATEDHERPESVIRUS)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次
禽病毒1型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格蛋白激酶C(19-36);蛋白激酶C選擇性抑制蛋白 Protein Kinase C (19-36);Protein Kinase C Selective Inhibitor Protein 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)ELISA檢測(cè)試劑盒Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit 96T/48T
蛋白激酶C(530-558) Protein Kinase C (530-558) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠缺血修飾白蛋白(IMA)試劑盒 Rat Ischemia Modified Albumin,IMA ELISA Kit
甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白拼接同種型3(104-173),人 pTH-Related Protein Splice Isoform 3 (140-173) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱RatCA125ELISAKit大鼠標(biāo)志物(CA125)規(guī)格:96T/48T
甲狀旁腺激素(13-34),人 pTH (13-34) (human) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)酪蛋白酶譜法(casein-zymography)電泳分析試劑盒(MMP1/3/7/12/13)5
甲狀旁腺激素(3-34),牛 pTH (3-34) (bovine) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR ELISAKitHEV-IgM人病毒IgM規(guī)格:48T/96T
S-I-G-S-L-A-K S-I-G-S-L-A-K 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 小鼠肥大/干細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(Kit/Sl/CD117)ELISA試劑盒 ,英文名: Kit/Sl/CD117 ELISA Kit
SAMs肽 SAMs Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 大鼠B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA檢測(cè)試劑盒RatB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T
猿猴病毒40大抗原氨基段肽段 Simian Virus 40 Large Tumor Antigen Amino-Terminal Peptide 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 人白介素1受體樣1(IL1RL1)試劑盒 Human IL1RL1 ELISA Kit
生長(zhǎng)抑制素-28 Somatostatin-28 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR 英文名稱MouseTumornecrosisfactorsolublereceptorⅡELISAKIT小鼠可溶性受體Ⅱ(TNFsRⅡ)規(guī)格:96T/48T
物質(zhì)P(1-7) Substance P (1-7) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR pFASTBAC+目的基因SF9昆蟲表達(dá)
L精氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg Mousehepaticlipase,HLELISA試劑盒小鼠肝脂酶(HL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L賴氨酸 HPLC≥98% 200mg MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit小鼠核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L賴氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 200mg MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISA試劑盒小鼠核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L酪氨酸 HPLC≥99% 200mg MousehepatitisBviruseaibody,HBeAbELISA試劑盒小鼠e抗體(HBeAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L亮氨酸(白氨酸) HPLC≥98% 200mg MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit小鼠e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L鳥氨酸鹽酸鹽 HPLC≥98% 20mg MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISA試劑盒小鼠e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L蘋果酸 HPLC≥98% 100mg MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISAKit小鼠表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L羥脯氨酸 HPLC≥98% 100mg MousehepatitisBvirussurfaceaibody,HBsAbELISA試劑盒小鼠表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L乳酸 HPLC≥98% 20mg MousehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISA試劑盒小鼠表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L色氨酸 HPLC≥98% 200mg MouseHexokinase,HKELISAKit小鼠己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。