產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3595 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
大腸桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒含致病性和非致病性供應(yīng) | E.coliPCR() | BKP3595 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:大腸桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒含致病性和非致病性供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
兔子紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 (-)-Noe's Reagent 108031-79-4 中文名:(-)-核歐沃豪斯效應(yīng)試劑 分子式:C24H38O3 度:98.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒 7-Amino-4-methylcoumarin 中文名:7-氨基-4-甲基香豆素 分子式:C10H9NO2 度:98.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 中文名: 分子式:C18H30O3 度:95.0%
兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 ((2-cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)quinolin-3-yl)methyl)triphenylphosphonium bromide 中文名: 分子式:C37H30BrFNP 度:98.0%
兔子睪酮(T)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chloramphenicol 中文名:氯霉素 分子式:C11H12Cl2N2O5 度:98.0% 豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒
Ganciclovir 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4 度:98.0% 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒
Oxiracetam 中文名:奧拉西坦 分子式:C6H10N2O3 度:98.0% 豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒
Piracetam 中文名:吡拉西坦 分子式:C6H10N2O2 度:98.0% 豚鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒
Fudosteine 中文名:福多斯坦 分子式:C6H13NO3S 度:98.0% 豚鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)ELISA試劑盒
大腸桿菌通用PCR檢測(cè)試劑盒含致病性和非致病性供應(yīng)β-NADH;還原性輔酶I二鈉鹽 β-NADH.hydrate 質(zhì)量規(guī)格:>90%,羅氏分包 大鼠神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA檢測(cè)試劑盒RatneuropeptideY,NP-YELISAKit 96T/48T
蘇拉明鈉 Suramin 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人膽(CH)試劑盒 Human cholesterol,CH ELISA Kit
彈性蛋白酶 Elastase, pancreatic from porcine pancreas 質(zhì)量規(guī)格:30 units/mg RatProAialNaiureticPeptide,Pro-ANPELISAKit大鼠前心肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
脂肪酶 Lipase 質(zhì)量規(guī)格:20000U/g,BR GST融合蛋白因子10α(FACTORXa)酶切試劑盒10
木聚糖酶 Xylanase from Trichoderma viride 質(zhì)量規(guī)格:BR,6萬(wàn)U/G Mousetoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒小鼠毒性休克綜合征1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透明質(zhì)酸,玻尿酸(分子量80萬(wàn)-150萬(wàn)) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:80萬(wàn)-150萬(wàn) 小鼠抗酸性0酸酶5b(ACP5b)ELISA試劑盒 ,英文名: ACP5b ELISA Kit
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量3K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:3000 大鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAi-ThrombinⅢ,AT-ⅢELISAKit 96T/48T
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量10K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:10000 人單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)試劑盒 Human LIMK1 ELISA Kit
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量90K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:90000 RatprocollagenⅠN-terminalpeptide,PⅠNPELISAKit大鼠Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量4K) Hyaluronic Acid 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR,M.W:4000 H4-K4基100微克
格列喹酮 Gliquidone 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠肌球蛋白重鏈4(MYH4)ELISA試劑盒 ,英文名: MYH4 ELISA Kit
格列喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Gliquidone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 ,英文名: MSTN ELISA Kit
人參皂苷Rf(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rf 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠抑制素/肌抑素(MSTN)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人參皂苷Rg1(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rg1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌生成抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 ,英文名: MSTN ELISA Kit
(R型)人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品) 20(R)Ginsenoside Rg2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 ,英文名: CK ELISA Kit
人參皂苷Rg2(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rg2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌酸激酶MB同工酶(CKMB)ELISA試劑盒 ,英文名: CKMB ELISA Kit
(R型)人參皂苷Rg3(標(biāo)準(zhǔn)品) 20(R)Ginsenoside Rg3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA試劑盒 ,英文名: CK-MB ELISA Kit
(S型)人參皂苷Rg3(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rg3 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌酸激酶同工酶MM(CK-MM)ELISA試劑盒 ,英文名: CK-MM ELISA Kit
人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rh1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌肽合酶1(CARNS1)ELISA試劑盒 ,英文名: CARNS1 ELISA Kit
(S型)人參皂苷Rh2(標(biāo)準(zhǔn)品) Ginsenoside Rh2 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠肌微管素相關(guān)蛋白9(MTMR9)ELISA試劑盒 ,英文名: MTMR9 ELISA Kit