產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3636 56 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測試劑盒價格 | Enterohemorrhagic E. coli(EHEC)O157:H7PCR | BKP3636 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過GenBank及自建龐大數(shù)據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
FO細胞,細胞 人胚肝二倍體細胞,CCC-HEL-1細胞 CL-0208SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2低分子MARK,英文名或英文縮寫:SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins,級別:BR,2u/mg,規(guī)格:25克
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-肌醋 Crqctinq monohydrctq 600-87-7
LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) dGTP,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE dGTP, Na3, 2H2O超級白色精細結晶粉末FROZENsigma
內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸鋇鹽10KU高,99%
TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人細胞裂解液 (陽性對照) (2,4-二錄本氧乙酸)
脂肪細胞培養(yǎng)基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A質量規(guī)格:酶活:>1500 U/mg,BC
CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 汽巴藍Cibacron blue 3G-A質量規(guī)格:ACS Grade
大鼠胰島細胞完全培養(yǎng)基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran質量規(guī)格:BR
MLE-12小鼠肺上皮細胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素級)Fluridone質量規(guī)格:>98%,植物激素級
NRG1 Protein Human 重組人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 標簽)組胺(>98%,BC)Histamine質量規(guī)格:>98%,BC
性大腸桿菌157:7血清型PCR檢測試劑盒價格人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺(標準品)Proglumide質量規(guī)格:含量測定
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)質量規(guī)格:>98%,高度選擇性的PPARβ/δ激動劑
牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)布洛芬(標準品)Ibuprofen質量規(guī)格:含量測定
A172細胞,膠質母細胞瘤細胞 ,HepG2細胞 人結直腸腺癌細胞;COLO 205比沙可啶(標準品)Bisacodyl質量規(guī)格:含量測定
小鼠瘤株;S180醋酸氯己定(標準品)Chlorhexidine Acatate質量規(guī)格:含量測定
HBL-100細胞,整合SV40基因的上皮細胞 人結直腸腺癌細胞,HCT-15細胞 CM-R021大鼠胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL錄化鑭1克
大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5腸激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用試劑
FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人細胞裂解液 (陽性對照) 異務全;3-基丁全;異纈草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3
人臍動脈內皮細胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量:1克
ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人細胞裂解液 (陽性對照) 503-66-23-羥基酸(含數(shù)量不等3,3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。