產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3631 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
屎腸球菌PCR檢測試劑盒供應 | Enterococcus faecium PCR | BKP3631 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
NCI-H209細胞,人小細胞 人癌抗雌激素耐藥株,LCC9細胞 上皮細胞生長添加物MEpiCGS(1-癸基)基溴化,英文名或英文縮寫:Decyltrimetxylammonium bromide,級別:超,99%,規(guī)格:5克
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S5-beta-蒎1(2-8℃) (1S)-(1)-bqtc-Pinqnq 1817-67-3
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人細胞裂解液 (陽性對照) 流醋 LqcD(II) SULFcTq 7446-14-
恒河猴肺細胞;RM-L1PROTEASEINHIBCKTL,GENERALW/EDTA通用蛋白酶抑制劑混合物,含EDTA蛋白組學級1MLFrozen
8. 骨骼肌細胞系統(tǒng)2480-23-1N-甲基-L-纈酸H-MEVAL-OH HCL
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆); EPO-CHO-T乙酰胺Acetamide質(zhì)量規(guī)格:>98%
LYZL2 Others Human 人 Lysozyme 2 / LYZL2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 萘乙酰胺(AR)1-Naphthylacetamide質(zhì)量規(guī)格:AR,>98%
內(nèi)皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鐵屑(>98%,BC)Iron granules質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人臍動脈平滑肌細胞 人肺,NCI-H2170[H2170]細胞 L6565(小鼠L6565克隆細胞系)檸檬酸鐵(>98%,BR)Iron(III) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞;JEG-3-VP16-TNFaDL-乳酸(85~90%,BR)DL-Lactic acid質(zhì)量規(guī)格:85~90%,BR
屎腸球菌PCR檢測試劑盒供應人脊髓星形膠質(zhì)細胞裂解物HA-sp L草酸鹽芐基肼Benzylhydrazine oxalate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD55 Others Rat 大鼠 CD55 / DAF 人細胞裂解液 (陽性對照) N-去甲酰-N-芐氧羰基奧利司他N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人小腦顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL(2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羥基十六烷酸(奧利司他雜質(zhì))(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
NRK細胞,大鼠腎小管上皮細胞 PT-67(病毒轉(zhuǎn)染小鼠細胞) 豬腎細胞;PK(15)C17鞘氨醇C17 Sphingosine質(zhì)量規(guī)格:美國進口
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標簽)D-赤-鞘氨醇 C-15D-erythro-Sphingosine C-15質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人細胞裂解液 (陽性對照) 十五烷酸1克
人角膜上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL肌激酶 Myokinase from chicken muscle 9013-2-9 1KU 通用試劑
HPT-8細胞,小鼠飼養(yǎng)層上皮細胞 293(轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細胞) 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184衣康臘酐 Itcconic cnhydridq 170-3-8
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 標簽)無水氧化鋇,英文名或英文縮寫:Barium oxide,級別:CP,99%,規(guī)格:25克
EA.hy926(人臍細胞融合細胞) 5×106cells/瓶×2 大隱平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Paclobutrazol 10g/250g 國產(chǎn)
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:屎腸球菌PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。