產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3727 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
加德納菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Gardnerella vaginalisPCR | BKP3727 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
HCCC-9810細(xì)胞,人膽管細(xì)胞型細(xì)胞 小鼠細(xì)胞G-CSF依賴性,NFS-60細(xì)胞 水貂肺上皮細(xì)胞;Mv.1.Lu(NBL-7)GENE-PAGEPLUS5%,WITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級(jí)COLDsigma
MDBK(牛腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2黃蓍樹(shù)膠粉 Gum tragacanth powder 9000-65-1 100G 通用試劑
Promocell C-22170 Myocyte GrowthMedium KIT, 心肌細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基套裝 500ml單唾液神經(jīng)節(jié)苷酯(-20℃) GcNGLIOSIDq GM1, cMMONIUM ScLT, BOVINq 37728-47-7
kasumi-1, 人細(xì)胞株Atr莠去津5克超,100mM
ART4 Others Mouse 小鼠 Art4 / CD297 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 32449-92-6D-葡糖醛酸內(nèi)酯D-Glucurone
視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)舒緩激肽三醋酸鹽Bradykinin acetate質(zhì)量規(guī)格:>98%
DDR2 Others Human 人 DDR2 Kinase / CD167b 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) α-促激素,素皮質(zhì)素α-MSH質(zhì)量規(guī)格:>95%
雜交瘤(B類(lèi));Z1510A2G6A2C7內(nèi)皮素-1,人,豬Endothelin-1, human,porcine質(zhì)量規(guī)格:>95%
GLC-82細(xì)胞,人 轉(zhuǎn)S9基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,ZA6細(xì)胞 CL-0050Caco-2(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蛙皮素,胃泌素Bombesin質(zhì)量規(guī)格:>95%
SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2活性腸肽VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)質(zhì)量規(guī)格:>95%
加德納菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)家豬皮膚細(xì)胞;SSC-S14-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮(含氮量:23.50-24.30 %)4-Phenyl-1,2,4-triazoline-3,5-dione質(zhì)量規(guī)格:含氮量:23.50-24.30 %
IFNGR1 Others Mouse 小鼠 IFNGR1 / CD119 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) N-叔丁基-α-苯基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))N-tert-Butyl-α-phenylnitrone質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HT-29 人細(xì)胞4-羥基氨苯蝶啶4-Hydroxy Triamterene質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
U-118 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-118 MG of brain asocytic blastoma DMEM培養(yǎng)基+10%FBS4-羥基氨苯蝶啶硫酸鈉鹽4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
VEGFA Protein Rat 重組大鼠 VEGF164 / VEGFA 蛋白2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CSNK1G2 Others Human 人 CSNK1G2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) L-酰-L-谷酰,英文名或英文縮寫(xiě):Alu-Gln,級(jí)別:BR,99%,規(guī)格:5克
長(zhǎng)白山豬胚胎皮膚成纖維樣細(xì)胞;201184三溴新務(wù)醇 3-Bromo-2,2-bis(bromomqthyl)propcnol 2012/9/2
BHK細(xì)胞,幼倉(cāng)鼠腎細(xì)胞 人細(xì)胞,CFPAC-1細(xì)胞 CM-R093大鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLGLYCEROLGELLOADINGDYE,5X5X核酸電泳上樣緩沖液,30%甘油超級(jí)暗紫色微粘稠液體COLDsigma
大鼠胰腺外分泌腺細(xì)胞;AR42J5′-CTP,3Na5-胞嘧啶核苷三嶙酸三鈉鹽500UBR,95%
RTN4R Others Human 人 RTN4R / NOGOR 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 109-43-3癸二酸二丁酯Dibutyl Sebacate (AS)
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:加德納菌PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。