產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3831 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1MA)1MARTPCR | BKP3831 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
C127(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2Campy-Cefex瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量:2~8℃100毫升
CN2 Others Human 人 CN2 / Coactin-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 11-基十一烷酸 11-Aminoundecanoic acid,97% 2432-99-7 25G 通用試劑
大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞;L6半纖維速酶(-20℃) HqMICqLLULcSq 902-26-3
BCAM Others Mouse 小鼠 BCAM 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) VANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級白色粉末FROZENsigma
BGC-823 人低分化前細(xì)胞531-91-9N,N-二本基聯(lián)本胺N,N'-Dipxenylbenzidine
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 脫氯阿托伐醌Deschloro Atovaquone質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人上皮細(xì)胞;MCF-10A鹽酸阿扎司瓊-d3Azasetron-d3, Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
FD6細(xì)胞,人細(xì)胞與倉鼠肺細(xì)胞雜交細(xì)胞 小鼠,P19細(xì)胞 CM-H103胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLY-25130 鹽酸Y-25130 Hydrochloride質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
P3X63Ag8(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2去甲基尼扎替丁Desmethyl Nizatidine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Promocell C-27437 Preadipocyte DiffereiationMedium KIT, 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基套裝 500ml慶大霉素C1aGentamicin C1a質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應(yīng)CD274 Others Rat 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 達(dá)沙替尼羧酸Dasatinib Carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠樹突狀細(xì)胞低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFPN-去甲基加蘭他敏N-Desmethyl Galanthamine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5 I型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLO-去甲基加蘭他敏O-Desmethyl Galanthamine質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
Saos-2,人成細(xì)胞 HumanO-去甲基加蘭他敏β-D-葡萄糖苷酸O-Desmethyl Galanthamine β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
EM2 Others Mouse 小鼠 EM2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 異吉非羅齊(吉非羅齊雜質(zhì))iso-Gemfibrozil (Gemfibrozil Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
小鼠細(xì)胞(B類);Pan02 透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL4-溴芘(>95.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)4-Bromopyrene
A549/DDP, 人肺腺癌耐藥細(xì)胞株 Human1,6-二氨基芘(>98.0%(HPLC)(N))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)1,6-Diaminopyrene
PLA2G1B Others Human 人 PLA2G1B / PLA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1,3-二氨基芘質(zhì)量規(guī)格:1,3-Diaminopyrene
人小膠質(zhì)細(xì)胞RNAHM miRNA5 μg2,7-二叔丁基芘(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)2,7-Di-tert-butylpyrene
CFD Others Human 人 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-溴甲基萘質(zhì)量規(guī)格:>99%1-(Bromomethyl)naphthalene
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:人病毒1型群型PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。