產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3862 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
【產(chǎn)品名稱】: 人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Human Tcell Lymphoma Virus Provirus (HTLV)TPCR
【貨號】: BKP3862
【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(最多凍融3次);
u 運輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
PC-3M-IE8(人高轉(zhuǎn)移細胞株) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)-2-叔丁氧羰基基-3-本基-1-,英文名或英文縮寫:Boc-L-pxenylalaninol,級別:BR,99%,規(guī)格:1克
DH82(犬巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0214SK-N-SH(人神經(jīng)母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-241,2,4-丁三醇;1,2,4-三羌基丁烷 1,2,4-Butcnqtriol 3068-00-6
大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元RN-c言醋米托醌 Mitoxcntronq xy7nochloridq 70476-8-3
TNFSF11 Others Human 人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,4-二乙磺酸,英文名或英文縮寫:PIPES,級別:BR,98%,規(guī)格:10克
恒河猴腎細胞;MMK3GDX 501(聚二本多孔小球)NA
RPS6KB1 Others Human 人 PS6K / RPS6KB1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 順式-格列美脲cis-Glimepiride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HBE, 正常人上皮細胞系反式-羧基格列美脲trans-Carboxy Glimepiride質(zhì)量規(guī)格:美國進口
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Y567[VTT C-79094]細胞 B95-8(EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細胞)灰黃霉素-13C,d3Griseofulvin-13C,d3質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人Burkkit瘤細胞;Daudi多聚己糖透明質(zhì)酸Hyaluronate Hexasaccharide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CD8A Others Human 人 CD8A / MAL 人細胞裂解液 (陽性對照) 透明質(zhì)酸四糖Hyaluronate Tetrasaccharide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書EFNA5 Others Cynomolgus 食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 人細胞裂解液 (陽性對照) 氟比洛芬Acyl-β-D-葡萄糖苷Flurbiprofen Acyl-β-D-glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mLO-6-芐基鳥嘌呤,MGMT 的抑制劑6-O-Benzylguanine(O6BG)質(zhì)量規(guī)格:>98%,MGMT 的抑制劑
MC-3T3細胞,小鼠前成骨細胞 LoVo(人細胞) 兔眼Tenon's囊成纖維細胞;RYTF竹紅菌甲素(標準品)Hypocrellin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
EFNB2 Protein Human 重組人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His 標簽)氟米龍Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格:>98%
CNE-2Z(人細胞) 5×106cells/瓶×2 原代心肌細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml氟米龍(標準品)Fluorometholone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Acc-2細胞,涎腺腺樣囊性癌細胞 人胃腺癌細胞,MGC-803細胞 兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)(S)-(+)-4-甲基-1-(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-4-Methyl-1-hexanol
tTA基因修飾的小鼠(B類);P19-CAG-tTA-3C3(S)-(+)-5-甲基-1-庚醇(>96.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(GC)(S)-(+)-5-Methyl-1-heptanol
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Indonesia/5/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-(+)-6-甲基-1-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-6-Methyl-1-octanol
人食道平滑肌細胞RNAHESMC miRNA5 μg(S)-(+)-2-辛醇(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(S)-(+)-2-Octanol
SLIK6 Others Human 人 SLIK6 人細胞裂解液 (陽性對照) (R)-鹽酸氟西汀質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-Fluoxetine Hydrochloride
PCR檢測試劑盒:
人類嗜淋巴細胞病毒前病毒通用PCR檢測試劑盒說明書 (一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。