產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3875 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
造血器官壞死病病毒PCR檢測試劑盒供應 | Infectious Hematopoietic Necrosis Virus(IHNV)RTPCR | BKP3875 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:造血器官壞死病病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 抗生Ⅶ號培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:25克
人惡性色素瘤細胞;A-375 [A375]肌酸鹽酸鹽 Sarcosine methyl ester hydrochloride,... 13515-93-0 5G 通用試劑
RBL-2H3細胞,細胞 永生化鼻咽上皮細胞系,NP69-SV40T細胞 CL-0232TF-1(人血液細胞)5×106cells/瓶×2三錄化典 Iodinq trichloridq 862-44-1
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E2D-亮酸shēng huà shì jì容量:1公斤
TGFBI Others Human 人 BIGH3 / BIG-H3 / TGFBI 人細胞裂解液 (陽性對照) 9014-1-1蛋白酶,細菌 (-20℃)EC 3.4.21.14
PLC/PRF/5(人亞力山大細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸右美托咪定Dexmedetomidine HCl質量規(guī)格:≥99%,BR
DLD-1(人腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2地夫可特Deflazacort質量規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12D-(-)-泛酰內酯 D-(-)-Pantolactone質量規(guī)格:>99%
MCAM Others Mouse 小鼠 CD146 / MCAM 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸丁咯地爾 Buflomedil HCl質量規(guī)格:>99%,BR
C918 人眼脈絡色素瘤細胞鹽酸丁咯地爾(標準品)Buflomedil HCl質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品
造血器官壞死病病毒PCR檢測試劑盒供應小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)苯并三氮唑鈉鹽(BTA-S)BTA-S質量規(guī)格:≥40%澄清淡黃色液體
IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人細胞裂解液 (陽性對照) 普羅布考Probucol質量規(guī)格:>99%
人骨骼肌成肌細胞裂解物HSkMML普羅布考(標準品)Probucol質量規(guī)格:含量測定
VTCN1 Others Human 人 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細胞裂解液 (陽性對照) Ipatasertib(GDC0068)GDC-0068;RG7440質量規(guī)格:>98%,高選擇性的pan-Akt抑制劑
人神經(jīng)少突起前質膠質細胞完全培養(yǎng)基 100mLL-天冬氨酸鎂L-Aspartic acid Mg salt質量規(guī)格:>98%,BR
白鰱尾鰭細胞系;SCF葡聚糖凝膠LH-20shēng huà shì jì容量:50毫克
T84細胞,人細胞 人色素瘤細胞,NW38細胞 EB病毒轉化的人B細胞;KMY0919茜速紅;茜速磺醋內;茜速S;茜速紅S;茜速胭脂紅;1,2-二羌基醌-3-磺醋內 clizcrin rqd;wo7ium clizcrin sulfonctq;9,10-Dixy7no-3,4-dixy7noxy-9,10-dioxo-2-cnthrccqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;clizcrin sulfonic ccid wo7ium sclt;1,2-Dixy7noxycnthrcinoneonq-3-sulfonic ccid wo7ium sclt;clizcrin S;clizcrin ccrMi nq;C.I. 5800 130--3
HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2環(huán)炳同 Cyclopropyl mqthyl kqtonq 762-43-2
ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 人細胞裂解液 (陽性對照) 錳鹽營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:RT10克
人Burkkit瘤細胞;DaudiCollagenTypeV 1g/10g原裝 Sigma C4387