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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4014 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
病毒PCR檢測試劑盒說明書【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融，有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】
u 樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
u 存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（最多凍融3次）；
u 運輸：采用冰壺或泡沫箱加冰密封進行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒，也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 病毒PCR檢測試劑盒說明書
【英文名稱】: Mumps Virus(MV)RTPCR
【貨號】: BKP4014
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
5、 檢測稀釋液B：1×10ml。
病毒PCR檢測試劑盒說明書其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
細胞名稱 種屬8-羥基鹽shēng huà shì jì容量：RT100克
JAM2 Others Mouse 小鼠 JAM-2 / JAM-B 人細胞裂解液 (陽性對照) 4,4,4-亞基三本晴 4,4',4''-Mqthylidqnqtrisbqnzonitnilq 11340-31-6
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich4-甲基傘形酮酰-β-D-糖苷shēng huà shì jì容量：2～8℃5克
人虹狀體上皮細胞 (HIPEpiC)( 5×105 )Paraffinoil石蠟油100克AR，99%
CM-M035小鼠肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL73-24-5腺嘌呤;胰堿;腺堿;腺尿環(huán);6-基尿環(huán)Adenine;6-AMino-1H-purine;6-AMino-3H-purine;6-AMino-9H-purine;1H-Purine-6-aMine;1,6-Dixy7no-6-iMinopurine;3,6-Dixy7no-6-iMinopurine
EPD5 Others Human 人 EPD5 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鉭標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Tantalum standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml
CM-M049小鼠子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL碲標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)Tellurium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml
BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株 神經(jīng)母細胞瘤細胞,LAN-5細胞 PA317(鼠胚胎成纖維細胞)鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/mL,基體:10%HCl)Terbium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/mL,基體:10%HCl
小鼠肥大細胞瘤細胞;P815釩標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3)Vanadium solution質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑:0.5mol/L HNO3
CD5 Others Human 人 CD5 人細胞裂解液 (陽性對照) 釔標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml in 10% HCl)Yttrium standard質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml in 10% HCl
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細胞裂解液 (陽性對照) N-碳芐氧基賴氨酸,N6-Cbz-L-賴氨酸N6-Cbz-L-Lysine質(zhì)量規(guī)格：98%，BR
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mLDL-賴氨酸鹽酸鹽DL-Lysine·HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
SGC-7901人胃腺癌細胞 SGC-7901 human gasic cancer cells 1640+10% FBSDL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Ierleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)DL-正纈氨酸DL-Norvaline質(zhì)量規(guī)格：0.99
人食道平滑肌細胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 RattusDL-焦谷氨酸DL-Pyroglutamic acid質(zhì)量規(guī)格：0.98
病毒PCR檢測試劑盒說明書BC-022(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠漿細胞瘤;MPC-11PHOSPHORAMIDON嶙酰二肽蛋白組學(xué)級5MG119942-99-3Frozen
人結(jié)膜成纖維細胞總RNAHConF NA沒食子醋兒茶速沒食子醋酯(+4℃) (-)-Gcllocctqchin gcllctq 433-96-9
CAT Others Human 人 CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) L-脯安醋芐酯言醋鹽 L-Prolinq bqnzyl qstqr xy7nochloridq 60668-01-1
豚鼠心肌細胞;GP-H1普魯蘭酶1克2～8℃，避光
A-673細胞，橫紋肌瘤細胞 Hela細胞耐藥亞株,Hela/DDP細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1Betaine 50g/100g/1kg原裝 Sigma B2629
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中，按100g:3ml的比例加入Trizol試劑，嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg組織，寧多勿少）置于玻璃勻漿器中勻漿后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振蕩15s，室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細吸取上層水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol，振搖，置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min，EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清，紙巾吸干，加入75%乙醇1ml，振搖，充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇，空氣干燥10min（可離心加快干燥，盡量吸盡離心液體）。
(12)半透明時將RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混勻），-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度，所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳，顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
