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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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無乳支原體PCR檢測試劑盒供應
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BKP4043
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-11-12
  • 更新日期: 2025-01-10
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BKP4043
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

PCR實驗方法步驟:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 7min
3
:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4待電泳檢測或-20長期保存。
4
PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

無乳支原體PCR檢測試劑盒供應

Mycoplasma agalactiaePCR

BKP4043

技術服務內容:

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優(yōu)勢:
1. 特異性:無乳支原體PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
 2.   
重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3.   
靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   
實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   
優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

心肌成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)Calciumoxalate乙二酸鈣25毫克CP,98%

Mo7e細胞,人巨細胞細胞株 小鼠正常肝細胞,NCTC1469細胞 角臘上皮細胞生長添加物CEpiCGS頭孢炳1(E)-異構體 Cqfprozil (q)-IsoMqr 9676-86-3

NCI-H226(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2Urokinase雅激酶5BR,2-5u/ul,99%

BT-474(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M085小鼠細胞完全培養(yǎng)基100mL Burkkit瘤細胞;DaudiSMBUFFERSM 緩沖液超級500MLRT

非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+D 1mg/5mg/10mg Fluka 01815
Dami(
人巨核細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質成纖維細胞HVMF鹽酸尼莫司汀Nimustine HCl(ACNU)質量規(guī)格:>97.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)

原代上皮細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100mlBEZ235 (Dactolisib)NVP-BEZ 235質量規(guī)格:>98%;ATP競爭性PI3KmTOR抑制劑

IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡嘧司特鉀Pemirolast potassium質量規(guī)格:>98%

大鼠成年表皮角質形成層細胞完全培養(yǎng)基 100mL培哚普利Perindopril erbumine質量規(guī)格:>98%,鹽形式

VERO C1008 (E6)非洲綠猴腎細胞 VERO C1008 (E6) of African green monkey kidney cells DMEM培養(yǎng)基+10%FBS保泰phenylbutazone質量規(guī)格:>98%,USP
無乳支原體PCR檢測試劑盒供應CD200 Others Mouse 小鼠 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-鹽酸奧昔布寧(S)-Oxybutynin hydrochloride質量規(guī)格:美國進口

人肝內膽管上皮細胞裂解物HIBEpiCL奧司他韋酸Oseltamivir Acid質量規(guī)格:美國進口

NRG1 Others Human NRG1-beta 1 (ECD) 人細胞裂解液 (陽性對照) 地布卡因Dibucaine質量規(guī)格:美國進口

人腦膜細胞完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸地布卡因-d9Dibucaine-d9 Hydrochloride質量規(guī)格:美國進口

MC53細胞,小鼠腎系膜細胞 RD(惡性胚胎橫紋肌瘤) 貓腎細胞;F81多利培南Doripenem質量規(guī)格:美國進口
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium DXF, M2-
巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml雙嘧達莫二-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole Di-O-β-D-glucuronide

人主動脈平滑肌細胞cDNAHASMC cDNA雙嘧達莫-D20 (主要的)質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole-D20 (Major)

IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細胞裂解液 (陽性對照) 雙嘧達莫單-O-β-D-葡萄糖苷酸質量規(guī)格:美國進口Dipyridamole Mono-O-β-D-glucuronide

人皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL酮基他米巴羅汀質量規(guī)格:美國進口Keto Tamibarotene

C2C12細胞,鼠肌原細胞 H08910(細胞) 大鼠胰島細胞瘤細胞;INS-1ent-伏立康唑質量規(guī)格:美國進口ent-Voriconazole
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。


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