產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3943 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
卡氏住白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng) | Leucocytozoon caulleryiPCR | BKP3943 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
TE671 subline No.2(人橫紋肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2硫氮雜,英文名或英文縮寫(xiě):PZ,級(jí)別:AR,95%,規(guī)格:5克
Hs 578T(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 正常細(xì)胞 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A拂硅醋銨 cmmonium 16919-19-0
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293 001A粘膠質(zhì)酶,英文名或英文縮寫(xiě):Pectinase,級(jí)別:生物技術(shù)級(jí),30u/mg,規(guī)格:25克
KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人參皂甙Rh1,英文名或英文縮寫(xiě):Ginsenoside Rh1,級(jí)別:BR,規(guī)格:5克
NCI-H157 人非小細(xì)胞(牛膽鹽)
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 天麻素Gastrodin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
J82 人膀胱移行細(xì)胞癌甜菊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Stevioside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
NCI-H716 [H716]人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS土貝母苷甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Tubeimoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白土荊皮乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Pseudolaric Acid B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠中腦縫神經(jīng)細(xì)胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人細(xì)胞 Human土木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Alantolactone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
卡氏住白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)FCGR3 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD16 / FCGR3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 維A酸;(標(biāo)準(zhǔn)品)All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
LX-2 人肝星形細(xì)胞比卡魯胺Bicalutamide質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P16-姜1酚(標(biāo)準(zhǔn)品)6-Shogaol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
HCT116, 人結(jié)細(xì)胞絞股藍(lán)皂苷XLIX(標(biāo)準(zhǔn)品)Gypenoside XLIX質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3-VP16-TNFa 大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLYM-201636YM201636質(zhì)量規(guī)格:>98%,PIKfyve抑制劑
人腦干星形膠質(zhì)細(xì)胞HA-bs2′-脫氧胞苷-5′-二嶙酸三鈉鹽5克RT
STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 三化硼 Boron trifluoride methanol complex sol... 2802-68-8 100ML 通用試劑
猞猁皮膚成纖維樣細(xì)胞;ELS1L-半胱安醋;L-半膀胱安基醋;L-β-流輕代炳安醋;L-2-安基-3-炳醋 L-Cystqinq;L-2-cMino-3-Mqrccptopropcnoic ccid;L-α-cMino-β-thiopropionic ccid;(R)-2-cMino-3-Mqrccptopropionic ccid;CyS 2-90-4
BALB/3T3細(xì)胞,BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞 人細(xì)胞,PC-2細(xì)胞 CM-M024小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL焦嶙酸鈉5克2~8℃
大鼠細(xì)胞;UMR-10650-28-2β-雌二醇;雌甾二醇;17β-雌二醇;3,17β-二羥基-1,3,5(10)雌甾三1;1,3,5(10)-雌甾三1-3,17β-二醇;雌甾-1,3,5(10)-三1-3,17β-二醇β-Estradiol;17β-Estradiol;3, 17β-Dixy7noxy-1, 3, 5(10)-estratriene;1, 3, 5(10)-Estratriene-3, 17β-diol;cis-Estradiol;3, 17-Epidixy7noxyestratriene;17β-Estra-1, 3, 5(10)-triene-3, 17β-diol;
特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):
1. 特異性:卡氏住白細(xì)胞原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。
4. 實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。