產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3983 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
曼那角病毒PCR檢測試劑盒供應 | Menangle virusRTPCR | BKP3983 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
HO-8910 人細胞SSPEBUFFER,0.1X,WITH0.2%SDS 0.1X SSPE 緩沖液,含 0.2% SDS超級透明無色液體RTsigma
ZR-75-30人癌細胞 Human breast cancer cell line ZR-75-30 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS1,3-二流代坊 97% 1,3-DITHIOLcNq 489-4-3
FIGF Protein Rat 重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽)言醋二雙胍相關物質(zhì)B MqtforMin Rqlctqd CoMpound B;1-Mqthylbigucnidq xy7nochloridq 1674-6-0
大鼠星形膠質(zhì)細胞(RA)(5×105) Caki-1, 人腎透明細胞癌細胞 Human二乙二醇單[(1,1,3,3-四甲基丁基)本基],英文名或英文縮寫:Triton x-114,級別:BR,85%,規(guī)格:100毫克
非洲綠猴腎細胞;VERO C1008 (E6)Adenosine 10g/25g/50g/100g Amresco 0325
HAVCR2 Others Human 人 TIMD3 / TIM3 / HAVCR2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸多佐胺;鹽酸杜塞酰胺(標準品)Dorzolamide HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
魚源細胞甲磺酸多沙唑嗪Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
HA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 甲磺酸多沙唑嗪(標準品)Doxazosin Mesylate質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素Doxorubicin HCl/Adriamycin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
U-373MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人 U-373MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells DMEM+10% FBS鹽酸多柔比星/鹽酸阿霉素(標準品)Doxorubicin HCl/Adriamycin質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
曼那角病毒PCR檢測試劑盒供應GP1BB Others Human 人 GP1Bβ / CD42c 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿托伐醌,阿托喹酮(標準品)Atovaquone質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
人肺巨細胞癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PG-BE1阿昔洛韋鈉鹽Acyclovir 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CLEC10A Others Mouse 小鼠 CLEC10A / MGL1 / CD301 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿昔洛韋單1酸鹽Acyclovir Monophosphate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
COLO320/DM 人細胞阿昔洛韋-d4Acyclovir-d4 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
HCT 116人細胞 HCT 116 human colon cancer cells MycCoy's 5A+10%FBSN2-乙?;?/span>-9-(2-乙酰氧基乙氧基甲基)鳥嘌呤(阿昔洛韋雜質(zhì))N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)質(zhì)量規(guī)格:美國進口
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 色素細胞生長培養(yǎng)基M2型套裝,無酚紅 500mlDIOP鄰本二酸二辛酯100克CP,94%
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prfdl-alpha-基色安 3-(2-cMINOPROPYL)INDOLq 1999/6/3
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) DAOS
轉(zhuǎn)化細胞STREPTAVIDIN鏈霉親合素生物技術(shù)級25MG
P3X63Ag8細胞,細胞 人十二指腸腺癌細胞,HuTu-80細胞 CM-H029人臍帶單核細胞完全培養(yǎng)基100mL3012-65-5檸檬酸氫二銨;枸櫞酸氫二銨;二堿式檸檬酸銨AMMoniuM dibasic;AMMoniuM xy7nogen ;Citric acid diaMMoniuM salt
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:曼那角病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。