產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP3963 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
同山羊腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒PCR檢測試劑盒供應 | MaediVisna Virus(MVV,)PCR | BKP3963 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:同山羊腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5正嶙酸鐵四水物shēng huà shì jì容量:100克
VCL Others Mouse 小鼠 VCL / Vinculin 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,6-二酚 2,6-,99% 100G 通用試劑
CL-0109HK-2(人腎小管上皮細胞)5×106cells/瓶×2乳果糖;;;4-O-β-D-半乳糖基-4-D-呋果糖 Lcctulosq;4-O-β-D-Glcctosyl-D-fructosq;Lcqvilcc 4618-18-
KMB-17細胞,人二倍體細胞系 轉HLA-2基因B細胞,T2細胞 KM小鼠子瘤株;U27納他霉素,英文名或英文縮寫:Pimaricin,級別:BR,規(guī)格:100毫克
B16(小鼠色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2(錄化溶液)
HFL1人胚 HFL1 in human embryo lung fibroblasts F12K培養(yǎng)基+10%FBS鋅試劑(≥85%(HPLC))Zincon質量規(guī)格:≥85%(HPLC)
SCGB1A1 Protein Mouse 重組小鼠 Uteroglobin / SCGB1A1 蛋白 (His 標簽)1,3-二甲基-5-吡唑酮1,3-Dimethyl-5-pyrazolone質量規(guī)格:0.96
人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1 人氣管上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL氟啶胺(標準品)Fluazinam質量規(guī)格:分析標準品
小鼠細胞;Sp2/0-Ag14氟節(jié)胺(標準品)Flumetralin質量規(guī)格:分析標準品
CD300A Others Human 人 CD300A 人細胞裂解液 (陽性對照) 氯吡脲(標準品)Forchlorfenuron質量規(guī)格:分析標準品
同山羊腦脊髓炎病毒梅迪維斯納病病毒PCR檢測試劑盒供應大鼠腎系膜細胞;RMC 細胞,U-2 OS細胞 Walker-256細胞,大鼠細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤)D-賴氨酸鹽酸鹽H-D-Lys-OH·HCl質量規(guī)格:>99%,BR
HCT116, 人結細胞 HumanD-甘露糖(標準品)D-Mannose質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細胞裂解液 (陽性對照) N-辛酰基-N-甲基葡糖胺(MEGA-8)N-Octanoyl-N-methylglucamine質量規(guī)格:≥97% ,進分
平衡鹽溶液HBSSN-癸?;?/span>-N-甲基葡糖胺(MEGA-10)N-Decanoyl-N-methylglucamine 質量規(guī)格:>98%,BR
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) 辛基-β-D-硫代吡喃葡萄糖苷n-Octyl-β-D-Thioglucopyranoside質量規(guī)格:>98%,BR
小鼠中腦縫神經(jīng)細胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人細胞 HumanLGD-4033 質量規(guī)格:>98%,BRLGD4033
兔主動脈平滑肌細胞;SMC5-溴嘧啶質量規(guī)格:>98%5-Bromopyrimidine
CSK Others Mouse 小鼠 CSK / C-Src kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 阿螺旋霉素質量規(guī)格:HSP90 抑制劑,進分17-DMAG
臍動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)大豆異黃酮質量規(guī)格:染料木素17%-20%,異黃酮含量在40-50%Soybean isoflavones
蚊子幼蟲體細胞;Aedes albopictus clone C6/36 人細胞,NCI-H1299細胞 A-431(表皮癌細胞)表戈米辛O(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Epigomisin O