產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP3991 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
米德爾堡病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)【儲(chǔ)存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個(gè)月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運(yùn)輸】
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(最多凍融3次);
u 運(yùn)輸:采用冰壺或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
【產(chǎn)品名稱】: 米德爾堡病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)
【英文名稱】: Middelburg VirusRTPCR
【貨號(hào)】: BKP3991
組成及試劑配制:
酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
米德爾堡病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
IFNA7 Others Human 人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) BRIJ35CONCENTRATEBRIJ-35*白色蠟狀固體RTsigma
AGS 人胃腺癌細(xì)胞1-錄忻烷 1-Chlorooctcnq 111-82-3
MADB-106-RFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)大鼠癌細(xì)胞 MADB-106-RFP-puro (leiviral consuct stable sain) of rat breast carcinoma cell 1640+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinALBUMIN,BOVINE牛血清白蛋白,組分V生物技術(shù)級(jí)灰白色至米白色凍干粉COLDsigma
TGFB1 Protein Rat 重組大鼠 Late TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 (His 標(biāo)簽)ALKALINEPHOSPHATASEpH9.5堿性嶙酸酶生物技術(shù)級(jí)RTsigma
人腎皮質(zhì)上皮細(xì)胞(HRCEpiC)( 5×105 ) mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞 Mouse1073-70-74-錄本鹽酸鹽4-Chloropxenylhydr xy7nochloride
H22 小鼠細(xì)胞乳糖酸(>98%,BC)Lactobionic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
ERBB2 Others Rat 大鼠 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-氨基酸氧化酶L-Amino acid oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格:BC
小鼠瘤株;S180L-氨基酸氧化酶L-Amino acid oxidase >4 U/mg質(zhì)量規(guī)格:BC
KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 乙酸鑭五水(>99%,BR)Lanthanum (III) acetate, pentahydrate質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLL-刀豆氨酸硫酸鹽(>98%,BR)L-Canavanine sulfate salt質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人細(xì)胞;Hela 229 [HeLa229]腺苷-5'-二1酸,三鈉鹽Adenosine 5'-diphposphate, tri salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SMYD3 Others Human 人 SMYD3 / ZMYND1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) L-天冬酰胺,無水物(標(biāo)準(zhǔn)品)L-Asparagine Anhydrous質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人B母細(xì)胞;HMy2.CIRL-天冬素/L-天冬酰胺L-Asparagine anhydrous質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,無水物
RK1 Others Canine 狗 kA / RK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N'-(三苯甲基)-L-天冬酰胺N'-Trityl-L-asparagine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCFL-天冬氨酸-1-芐酯L-Aspartic Acid 1-Benzyl Ester質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
米德爾堡病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)GLC-82-TK細(xì)胞,人(轉(zhuǎn)染TK基因的GLC-82細(xì)胞) 非洲綠猴腎細(xì)胞,COS-1細(xì)胞 CL-0066COLO 205(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2阿齊沙坦(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Azilsartan
SW579(人甲狀腺鱗癌細(xì)胞 ) 5×106cells/瓶×2伊維菌素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Ivermectin
HSaVEC-c 人隱內(nèi)皮細(xì)胞(HSaVEC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)SB431542,SB-431542質(zhì)量規(guī)格:>98%TGF-β抑制劑SB-431542
腎小管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)米拉貝隆質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRMirabegron
GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿莫曲普坦 N-氧化物質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Almotriptan N-Oxide
PCR檢測試劑盒
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4oC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4oC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4oC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20oC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。