產地 | 進口、國產 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4210 |
用途 | 公司產品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術服務內容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬腸病毒PCR檢測試劑盒說明書 | Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR | BKP4210 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 中文名:2-萘基N-苯甲?;奖彼狨?/span> 分子式:C26H21NO3 干細胞因子受體 (SCF R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
2-Methylsulfanylpyrimidin-4(3H)-one 中文名: 分子式:C5H6N2OS 血清淀粉樣蛋白 英文名稱: serum amyloid A protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SAA
2-Methylanthraquinone 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Salusin-α 英文名稱: Salusin-α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Salusin-α
2-Methyl-4-nitrobenzoic acid 中文名: 分子式:C8H7NO4 干細胞因子 英文名稱: stem cell factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 中文名: 分子式:C16H15NO3 干細胞因子受體 英文名稱: stem cell factor receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: SCF R
焦碳酸二乙脂 10ml Amorolfine 中文名:鹽酸阿莫洛芬 分子式:C21H36ClNO 度:98.0%
膠質纖維酸性蛋白 英文名稱: glial fibrillary acidic protein 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GFAP 3-Nitro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 899822-97-0 中文名: 分子式:C17H25NO3
膠質細胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子 英文名稱: glial cell line-derived neuoophic factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GDNF L-Dihydroorotic acid 中文名:L-4,5-二氫乳清酸 分子式:C5H6N2O4
堿性酯酶染液 Wright'dye 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
堿性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 315-37-7 中文名:庚酸睪酮 分子式:C26H40O3 度:98.0% 關鍵詞:
豬腸病毒PCR檢測試劑盒說明書TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) 二乙二醇二乙酸酯(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)Diethylene Glycol Diacetate
原代內皮細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml三甘醇二乙酸酯(>98.0%(GC))質量規(guī)格:>98.0%(GC)Triethylene Glycol Diacetate
HT1080細胞,纖維細胞 細胞,HCE1細胞 人表皮色素細胞-中色素總RNAHEM-m NAO-乙?;吐樗峒柞?/span>(>80.0%(GC))質量規(guī)格:>80.0%(GC)Methyl O-Acetylricinoleate
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+檸檬酸三乙酯(>99.0%(GC))質量規(guī)格:>99.0%(GC)Triethyl
FGFR4 Others Human 人 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照) 二去甲基佐米曲坦質量規(guī)格:美國進口Didesmethyl Zolmitriptan
Bel-7405細胞,人細胞 逆轉錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細胞,PA317細胞 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21改良番茄汁培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:500毫升
L6(大鼠成肌細胞) 5×106cells/瓶×2姆沙伯 G AW ChroMosorb G cW;
Promocell C-28013 Mesenchymal Stem CellOsteogenic Differe. Medium, 間充質干細胞成骨分化培養(yǎng)基(即用型) 100ml聚乙二醇 1000 Poly(ethylene glycol) 1,000 (PEG 1000) 25322-68-3 100G 通用試劑
人表皮色素細胞-淺色素RNAHEM-l miRNA5 μg靛藍胭脂紅shēng huà shì jì容量:5克
VASN Others Human 人 VASN / Vasorin 人細胞裂解液 (陽性對照) D-Galacturonicacid 5g/10g/25g原裝 Fluka 48280
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬腸病毒PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。