產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4227 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Porcine Torovirus(PToV)RTPCR | BKP4227 |
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
3,4-Dihydro-3,4-dihydroxynaphthalen-1(2H)-one 中文名: 分子式:C10H10O3 度:97.0% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
alpha-Terthienylmethanol 中文名: 分子式:C13H10OS3 度:% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Eleutheroside C 中文名: 分子式:C8H16O6 度:97.5% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Catalpalactone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Catalponol 中文名: 分子式:C15H18O2 度:98.0% 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
尿激酶型纖溶酶原激活因子 (uPA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 O-Benzyl-L-tyrosine 16652-64-5 中文名:O-芐基-L-酪氨酸 分子式:C16H17NO3 度:98.0%
定性測試盒 Acid esterase stain 3-Quinuclidinone 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO
內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素 英文名稱: Visfatin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Visfatin Otophylloside T 1642306-14-6 中文名: 分子式:C48H70O18
內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Ondansetron 中文名:昂丹司瓊 分子式:C18H19N3O
內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素 英文名稱: Human Glucocoicoid Endogenous 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: GC Androstenediol 521-17-5 中文名:雄烯二醇 分子式:C19H30O2
豬環(huán)曲病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)T24, 人細胞他扎羅?。?biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定Tazarotene
人細胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL他扎羅汀質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRTazarotene
Hepa 1-6 小鼠細胞靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ganoderic acid D
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸左西替利嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Levoceitrizine HCl
615小鼠株;Ca761鹽霉素,沙利霉素質(zhì)量規(guī)格:assay 12%~24%Salinomycin
TNFSF11 Protein Human 重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)SALICYLICACID水楊酸鈉*100G54-21-6RT
大鼠神經(jīng)質(zhì)細胞(RNsn)(1×106) BxPC-3, 人原位胰腺腺癌細胞株 Human錄化鉍 Bismuth trichloridq 7787-60-
人胚腎細胞;293 [HEK-293]AIBI偶氮二異基咪唑啉鹽酸鹽500毫克AR
IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) TRIS-GLYCInepUFFER,10XSOLUTIONTris-甘酸緩沖液蛋白組學(xué)級1LCOLD
人腎動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL(多效唑)