產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4379 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Staphylococcus hominisPCR | BKP4379 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
7α-Hydroxysitosterol 34427-61-7 中文名:7α-羥基谷甾醇 分子式:C29H50O2 組織PKG-Iα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Ecdysterone 20,22-monoacetonide 22798-96-5 中文名: 分子式:C30H48O7 humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol 289054-34-8 中文名: 分子式:C28H46O3 兔子骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Qingyangshengenin 84745-94-8 中文名:青陽參苷元 分子式:C28H36O8 Human androgen binding protein (ABP) ELISA Kit 人雄激素結(jié)合蛋白(ABP)ELISA試劑盒
Caudatin 38395-02-7 中文名:告達(dá)庭 分子式:C28H42O7 Humanai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit 人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
兔血清總補(bǔ)體(CH50)ELISAKit ELISA. 96T/48T Adrenosterone 382-45-6 中文名:腎上腺甾酮 分子式:C19H24O3
兔血清淀粉樣蛋白Aelisa試劑盒 兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔血清淀粉樣蛋白A試劑盒、兔血清淀粉樣蛋白A elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 7-Acetoxy-4-methylcoumarin 中文名:7-乙酰氧基-4-甲基香豆素 分子式:C12H10O4
兔血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 29927-08-0 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S
兔血清(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 度:99.0%
兔血凝素樣氧化受體1 英文名稱: Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LOX-1 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 66335-38-4 中文名: 分子式:C9H12FN3O4 度:99.0%
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)MDCK(犬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5,7-二氯-8-羥基喹哪啶;氯喹那多質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRChlorquinaldol
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A癸氧喹酯;乙癸氧喹酯質(zhì)量規(guī)格:>99(T)Decoquinate
DCLK1 Others Human 人 DCAMKL1 / DCLK1 (aa 1-705) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (S)-2-氨基-5-甲氧基四氫萘鹽酸鹽 質(zhì)量規(guī)格:>98%(S)-2-Amino-5-methoxytetralin Hydrochloride
CL-0057CCL-149(大鼠肺泡上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2巴馬司他;BB94質(zhì)量規(guī)格:>98%,MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑Batimastat(BB-94)
U266B1 [U266], 人細(xì)胞 細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 CFPAC-1(細(xì)胞)頭孢克1(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Cefixime
小鼠條紋神經(jīng)細(xì)胞(MN-s)(1×106)1,2,3,5-Tetra-O-acetyl-β-D-ribofuranose四乙酰核糖10毫升,98%
狗腎細(xì)胞;Super Tube杜邦制冷劑 1,1,1,2-Tqtrcfluoroqthcnq 811-97-
小鼠T瘤細(xì)胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA 小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL炳二晴 99% Mclonic ccid 141-8-
CHO, 中國倉鼠卵巢細(xì)胞系 其它2-硝基本-α-D-半乳糖苷,英文名或英文縮寫:ONPG,級別:共軛級,4500u/mg,小牛腸,芬末,規(guī)格:1克
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 148-24-38-羥基;8-氫氧化;8-羥基氮(雜);鄰羥基氮(雜)8-xy7noxyinoneoline;Oxyinoneoline;Oxine;inoneopxenol;8-inoneolinone;xy7noxybenzopyridine;Oxybenzopyridine;pxenopyridine;Oxy
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:人葡萄球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。