產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4395 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Streptococcus iniaePCR | BKP4395 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
9-Hydroxy-α-lapachone 22333-58-0 中文名: 分子式:C15H14O4 HumanPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Dehydro-α-lapachone 15297-92-4 中文名: 分子式:C15H12O3 兔子腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
α-Lapachone 4707-33-9 中文名: 分子式:C15H14O3 Human adenosine deaminase (ADA) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒
9-Methoxy-α-lapachone 35241-80-6 中文名: 分子式:C16H16O4 HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit 人果糖1,6二0酸縮酶(FDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
4,9-Dihydroxy-α-lapachone 56473-67-7 中文名: 分子式:C15H14O5 humandopamine,DAELISA試劑盒人多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
兔子白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Chloroguanine riboside 中文名:6-氯鳥嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4 度:95.0%
兔子白介素3(IL-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxypurine 57500-07-9 中文名:6-芐氧基嘌呤 分子式:C12H10N4O 度:98.0%
兔子白介素2elisa試劑盒 兔子白介素2試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子白介素2試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子白介素2試劑盒、兔子白介素2elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole 中文名: 分子式:C5H9N3O 度:98.0%
兔子白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 6-Chloroguanine riboside 中文名:6-氯鳥嘌呤核苷 分子式:C10H12ClN5O4
兔子白介素1可溶性受體I(IL-1sRⅠ)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-Benzyloxyindole 15903-94-3 中文名:6-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)mCF, 小鼠成纖維細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞,7F2細(xì)胞 EL4. IL-2(瘤細(xì)胞)喹硫平二聚體雜質(zhì)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Quetiapine Dimer Impurity
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;HCT-8 [HRT-18]羥基喹硫平雜質(zhì)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Quetiapine Hydroxy Impurity
FGFRL1 Others Mouse 小鼠 FGFRL1 / FGFR5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-氧基喹硫平質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Quetiapine N-Oxide
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5喹硫平磺酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Quetiapine Sulfoxide
BAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 奎寧單鹽酸鹽二水合物質(zhì)量規(guī)格:>99%Quinine hydrochloride dihydrate
MET Others Mouse 小鼠 c-MET / HGFR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 果糖苷酶,英文名或英文縮寫:Invertase,級(jí)別:超,99%,規(guī)格:10克
人細(xì)胞;NCI-H1650N,N’-羰基二咪坐 (CDI)(2-8℃) 1,1'-Ccrbonyldiimidczolq 230-6-1
RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類合胞病毒 hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 錳分 Mcngcnqsq 7439-96-2
MDA-MB-435 人癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞香草醛,英文名或英文縮寫:Vanillin,級(jí)別:AR,99%,規(guī)格:25克
Calu-6人退行性癌細(xì)胞 Calu-6 human degenerative cancer cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS7524-50-7L-本酸鹽酸鹽;
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:海豚鏈球菌PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。