產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BKP4442 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
馬泰勒梨形蟲PCR檢測試劑盒原說明書 | Theileria equiPCR(Babesia equi) | BKP4442 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:馬泰勒梨形蟲PCR檢測試劑盒原說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Androstanolone 17-benzoate 1057-07-4 中文名:雄諾龍苯甲酸酯 分子式:C26H34O3 人組織型纖溶酶原激活因子(tPA)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit
Rosuvastain Calcium 147098-20-2 中文名:瑞舒伐他汀鈣 分子式:C22H28FN3O6S 人纖溶抑制因子(TAFI)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human TAFI (Thrombin Activatable Fibrinolysis Inhibitor) ELISA Kit
Ambrisentan 177036-94-1 中文名:安倍生坦 分子式:C22H22N2O4 人纖維蛋白(FBL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FBL (Fibrillarin) ELISA Kit
Propacetamol 66532-86-3 中文名:鹽酸丙帕他莫 分子式:C14H21ClN2O3 人生長激素受體(GHR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human GHR (Growth Hormone Receptor) ELISA Kit
Pirfenidone 53179-13-8 中文名:哌非尼酮 分子式:C12H11NO 人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子脫氫表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0%
兔子透明質(zhì)酸elisa試劑盒 兔子透明質(zhì)酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子透明質(zhì)酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子透明質(zhì)酸試劑盒、兔子透明質(zhì)酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 9-Hydroxy-α-lapachone 中文名: 分子式:C15H14O4 度:96.0%
兔子透明質(zhì)酸(HA)ELISAKit ELISA. 96T/48T 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名:9,9-雙(4-羥苯基)芴 分子式:C25H18O2
兔子髓0脂堿性蛋白elisa試劑盒 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子髓0脂堿性蛋白試劑盒、兔子髓0脂堿性蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 9-Methoxy-α-lapachone 35241-80-6 中文名: 分子式:C16H16O4 度:% 關(guān)鍵詞: 梓; 萘醌; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid 54232-58-5 中文名: 分子式:C18H30O3
馬泰勒梨形蟲PCR檢測試劑盒原說明書IL33 Protein Human 重組人 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白鹽酸諾拉曲噻質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Nolatrexed dihydrochloride
PC-3M-2B4(人低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株) 5×106cells/瓶×2 CHO/dhFr-(中國倉鼠二氫葉酸還原酶缺陷細(xì)胞)PD 173074質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)PD 173074
CL-0253A-427(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2PH-797804質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)PH-797804
PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) Celite硅藻土,酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A)質(zhì)量規(guī)格:用于總膳食纖維含量分析,TDF-100ACelite, acid-washed
人膀胱平滑肌細(xì)胞cDNAHBdSMC cDNACelite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined))質(zhì)量規(guī)格:助濾劑,通量煅燒(filter aid,flux calcined)Celite® 545
EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (R)-(+)-氨魯米特質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(R)-(+)-Aminoglutethimide
人食道上皮細(xì)胞總RNAHEEpiC NAS-(-)-氨魯米特L-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口S-(-)-Aminoglutethimide L-Tartrate Salt
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) R-(+)-氨魯米特L-1酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口R-(+)-Aminoglutethimide L-Tartrate Salt
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-212-羥基-氟他胺質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口2-Hydroxy-flutamide
PC-2細(xì)胞,人細(xì)胞 人細(xì)胞系,HS-4細(xì)胞 小鼠色素瘤瘤株;B16(S)-(-)-O-去甲卡維地洛質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口(S)-(-)-O-Desmethyl Carvedilol
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。