產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BKP4448 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
瑟氏泰勒蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格 | Theileria sergentiPCR | BKP4448 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:瑟氏泰勒蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
Androstenedione 1963/5/8 中文名:雄烯二酮 分子式:C19H26O2 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Boldenone 846-48-0 中文名:寶丹酮 分子式:C19H26O2 人脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒 人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪酸結(jié)合蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
4-(4-(5-(Aminomethyl)-2-oxooxazolidin-3-yl)phenyl)morpholin-3-one 446292-10-0 中文名: 分子式:C14H17N3O4 人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒elisa試劑盒 人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒、人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白試劑盒elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
4-Chloro-6-iodoquinazoline 98556-31-1 中文名: 分子式:C8H4ClIN2 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白試劑盒、人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
5-Formyl-2-furylboronic acid 27329-70-0 中文名: 分子式:C5H5BO4 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88elisa試劑盒 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88試劑盒、人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88 elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔子調(diào)節(jié)蛋白elisa試劑盒 兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子調(diào)節(jié)蛋白試劑盒、兔子調(diào)節(jié)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Acid Black 1 1064-48-8 中文名:酸性黑 1 分子式:C22H14N6Na2O9S2 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Acyclovir 59277-89-3 中文名:阿昔洛韋 分子式:5O3
兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISAKit ELISA. 96T/48T Acetylatractylodinol 61582-39-6 中文名:乙酰蒼術(shù)素醇 分子式:C15H12O3 度:97.5% 關(guān)鍵詞: 抗菌; ; 蒼術(shù); 聚乙炔; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
兔子調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Hydroxy-2-methylanthraquinone 6268/9/3 中文名:1-羥基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O3 度:99.0% 關(guān)鍵詞:
兔子緊張素1型受體(AT1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester 中文名: 分子式:C16H15F2NO4 度:98.0%
瑟氏泰勒蟲PCR檢測試劑盒價(jià)格IL25 Protein Mouse 重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽)天狼猩紅質(zhì)量規(guī)格:BSDirect red 80
人周邊細(xì)胞 (HPNC)( 5×105 ) 小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) MouseDL-苯甘氨酸(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCDL-alpha-Phenylglycine
CM-H081人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.100mg/ml)質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/mlButachlor solution
IFNA2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNA2 / Ierferon alpha 2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 丁草胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,95%Butachlor
人成纖維細(xì)胞HLF丁草胺標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=4%)質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%Butachlor solution
SERPINF2 Others Mouse 小鼠 SerpinF2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-三苯甲基洛沙坦(洛沙坦雜質(zhì)H)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口N-Trityl Losartan (Losartan Impurity H)
軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)洛沙坦-d3質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Losartan-d3
JTB Others Human 人 Jumping anslocation Breakpoi / JTB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 羧酸洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Losartan Carboxylic Acid
615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615洛沙坦質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口Losartan Carboxaldehyde
SK-LU-1細(xì)胞,人低分化 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞 CL-0106HFL1(人)5×106cells/瓶×2MQAE(氯離子熒光探針)質(zhì)量規(guī)格:進(jìn)分N-(Ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium bromide
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。