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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):BKP6211
  • 價(jià)格: ¥2499/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-12-25
  • 更新日期: 2024-12-23
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BKP6211
用途 公司產(chǎn)品僅用物科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號(hào)
是否進(jìn)口

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容:

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳,以軟件分析電泳條帶的灰度值(IOD值),通過(guò)與內(nèi)參基因的灰度值比較,判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

產(chǎn)品名稱(chēng)英文名稱(chēng)貨號(hào)
核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)
BKP6211

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法

1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix (2mM)             

4 μl     引物1(10pM)                 

2 μl     引物2(10pM)                 

2 μl     Taq酶 (2U/μl)               

1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。

3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì):

1. 特異性:核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)使用的引物均經(jīng)過(guò)詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過(guò)GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。

 2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過(guò)大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。

3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無(wú)需繁瑣的增菌過(guò)程。

4.   實(shí)用性:檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過(guò)程為3-4個(gè)小時(shí)。

5.   優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過(guò)大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。


反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

檸檬酸三甲酯(>98.0%(GC))  Trimethyl   質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱(chēng)HumanCINC-2a/bELISAKitCINC-2a/b規(guī)格:96T/48T

檸檬酸三丙酯(>97.0%(T))  Tripropyl   質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T) 英文名稱(chēng)HumanCINC-3ELISAKitCINC-3規(guī)格:96T/48T

N-丁基苯磺酰胺(>98.0%(HPLC)(N))  N-Butylbenzenesulfonamide  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N) 英文名稱(chēng)HumanCKMBELISAKit人激動(dòng)異構(gòu)酶MB(CKMB)規(guī)格:96T/48T

D-(+)-樟腦(>98.0%(GC))  (+)-Camphor  質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC) 英文名稱(chēng)HumanCoicoseroneELISAKit人皮質(zhì)同(Coicoserone)規(guī)格:96T/48T

阿卡波糖十三醋酸酯  Acarbose Tridecaacetate   質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanCoisolELISAKit人皮質(zhì)醇(Coisol)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

阿昔洛韋鈉鹽  Acyclovir    質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanCollageypeIELISAKitI型膠原(CollageypeI)規(guī)格:96T/48T

阿昔洛韋單鹽  Acyclovir Monophosphate   質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanCollageypeIIELISAKitII型膠原(CollageypeII)ELISAKit規(guī)格:96T/48T

阿昔洛韋-d4  Acyclovir-d4   質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanCollageypeIIIELISAKITIII型膠原(Collagen)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T

N2-乙?;?/span>-9-2-乙酰氧基乙氧基甲基)鳥(niǎo)嘌呤(阿昔洛韋雜質(zhì))  N2-Acetyl-9-(2-acetoxyethoxymethyl)guanine (Acyclovir Impurity)  質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanconnectivetissuegrowthfactorELISAKit人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(ctgf)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

腺苷3,5-環(huán)單硫代酯,8--,Rp-異構(gòu)體鈉鹽  Adenosine 3,5-cyclic Monophosphorothioate, 8-Chloro-, Rp-Isomer,  Salt   質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口 英文名稱(chēng)HumanCPAFELISAKIT人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)規(guī)格:96T/48T
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit     Acetophenone tosylhydrazone  中文名:苯乙酮對(duì)甲苯磺酰基腙  分子式:C15H16N2O2S  度:98.0%

核酸釋放劑(DNA-RNA通用型)兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名:  分子式:C12H7ClOS  度:%

兔子纖溶酶原elisa試劑盒   兔子纖溶酶原試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   兔子纖溶酶原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔子纖溶酶原試劑盒、兔子纖溶酶原eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Arbidol hydrochloride  131707-23-8  中文名:鹽酸阿比朵爾  分子式:C22H26BrClN2O3S 



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