產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64649 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
人病毒6型PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64649 |
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務:DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
5-8F, 人高轉移細胞系 Human絡塞維(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Rosavin
ANGPT2 Others Human 人 ANG2 / Angiopoietin-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 落新婦苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Astilbin
星形膠質細胞培養(yǎng)基ACM馬錢苷(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Loganin
CD164 Others Human 人 CD164 / Endolyn 人細胞裂解液 (陽性對照) 馬錢苷酸(標準品)質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品Loganic acid
GPS5 豚鼠皮膚成纖維樣細胞羅漢果皂苷Ⅲe質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品mogroside
III e
間充質干細胞成骨細胞分化生長添加物MODS杯[6]芳烴(>95.0%(HPLC))Calix[6]arene質量規(guī)格:>95.0%(HPLC)
IL13RA1 Others Rat 大鼠 IL13RA1 細胞裂解液 (陽性對照) 4-叔丁基杯[6]芳烴(含5-10%的苯)(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[6]arene (contains 5-10% Benzene)質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
牙周膜成纖維細胞完全培養(yǎng)基 100mL4-叔丁基-1-(乙氧羰基甲氧基)硫雜杯[4]芳烴(>94.0%(HPLC))4-tert-Butyl-1-(ethoxycarbonylmethoxy)thiacalix[4]arene質量規(guī)格:>94.0%(HPLC)
T6-Swiss albino細胞,小鼠胚胎成纖維細胞 B16(小鼠色素瘤細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-14-叔丁基磺酰杯[4]芳烴(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylsulfonylcalix[4]arene質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
EFNA3 Protein Human 重組 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白4-磺酸基硫雜[4]芳烴鈉鹽(>98.0%(HPLC))4-Sulfothiacalix[4]arene Salt質量規(guī)格:>98.0%(HPLC)
輸尿管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)叔丁氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯 Boc-Asp(OtBu)-OH質量規(guī)格:>98%,BR
CREB3L1 Others Human CREB3L1 / OASIS (aa 396-519) 細胞裂解液 (陽性對照) BOC-D-脯氨酸Boc-D-Pro-OH質量規(guī)格:>99%,BR
大鼠氣管上皮細胞;RTEBOC-L-絲氨酸甲酯Boc-Ser-OMe質量規(guī)格:BR
PG49細胞,系 轉S9基因倉鼠卵巢細胞,ZA1細胞 CL-0042BxPC-3(原位*腺癌細胞)5×106cells/瓶×2N-BOC-O-芐基-L-絲氨酸N-BOC-O-Benzyl-L-serine質量規(guī)格:0.98
SVEC4-10(小鼠結內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2BOC-L-蘇氨酸Boc-Thr-OH質量規(guī)格:>98%,BR
人骨骼肌衛(wèi)星細胞RNAHSkMSC miRNA5 μg5′-鳥苷酸二鈉,英文名或英文縮寫:5′-GMP,2Na,級別:高,97%,規(guī)格:500u
BACE2 Others Mouse 小鼠 BACE2 / Beta secretase 2 人細胞裂解液 (陽性對照) 隊二本二聚體 [2.2]Pcrccyclophcnq 1633--3
人主動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL硅化 McgnqsiuM silicidq, 99.99% 831-39-6
S-180細胞,小鼠細胞 THP-1(單核細胞) 人細胞;C-33AAzometxine-Hmonowo7iumsalthydrate水人病毒6型PCR試劑盒合偶氮甲基-H一鈉鹽25克AR,44%
集落刺激因子106-47-84-錄本胺4-CHLOROANILINE PESTANAL