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XL10-Gold 電擊感受態(tài)細胞

起訂量 (瓶)價格

1-10￥2350 /瓶

≥10￥1250 /瓶

品牌：帛科

產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)

貨號：BK-G63227

發(fā)布日期： 2021-02-21
更新日期： 2024-12-24

發(fā)送咨詢信息

產(chǎn)品詳請

產(chǎn)地	進口、國產(chǎn)
保存條件	低溫冷藏
品牌	帛科
貨號	BK-G63227
用途	產(chǎn)品僅用于科研
組織來源	詳見說明書
細胞形態(tài)	詳見說明書
是否是腫瘤細胞	否
CAS編號
保質(zhì)期	詳見說明書
器官來源	詳見說明書
免疫類型	詳見說明書
品系	詳見說明書
生長狀態(tài)	詳見說明書
物種來源	詳見說明書
包裝規(guī)格	50ul5 50ul20
純度	%
是否進口	是

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：XL10-Gold 電擊感受態(tài)細胞
規(guī)格：50ul*5 50ul*20
分類：克隆感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀）干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項：
1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，卻一個菌都沒長出來，重復(fù)了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關(guān)，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應(yīng)該是連接的問題。所有連接反應(yīng)建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉(zhuǎn)化的，但是由于凍存時間過長，轉(zhuǎn)化效率會有所下降，如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。
操作方法：
1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

組胺二鹽酸-α,α,β,β-d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Histamine-α,α,β,β-d4 Di 人骨堿性1酸酶(BALP)ELISA檢測試劑盒Humanbonealkalinephosphatase,BALPELISAKit 96T/48T 石蠟切片神經(jīng)纖維銀染試劑盒50

R(-)-α-甲基組胺二鹽酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口R(-)-α-Methylhistamine Di 大鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒 Rat ierferon-inducible protein 10,IP-10 ELISA Kit ELISAKitNMP-22人核基質(zhì)蛋白22規(guī)格：48T/96T

酸卡巴拉汀- 標記d4質(zhì)量規(guī)格：美國進口Rivastigmine Tartrate - Labeled d4 CLIAKitforVB6(MouseVitaminB6)ELISAKit小鼠維生素B6規(guī)格：48T/96T 大鼠胃動素受體(MTLR)ELISA試劑盒，英文名： MTLR ELISA Kit

根皮苷（標準品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品Phlorizin 明膠法大鼠胚胎干細胞繁殖試劑盒10 人核心抗體(HBcAb)ELISA檢測試劑盒Humanai-hepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit 96T/48T

rabbitthyroxine,T4ELISAKit兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 14937-32-71,2,3,4,6-O-五沒食子酰葡萄糖品牌 1,2,3,4,6-O-pentagalloylglucose

載玻片細胞CDK6蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20 1241-87-81-咖啡?？鼘幩嵋?guī)格 1-caffeoylquinic acid

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小鼠組織蛋白去乙?；?/span>2(Hdac2/Yy1bp)ELISA試劑盒，英文名： Hdac2/Yy1bp ELISA Kit 30964-13-71,5-二咖啡?？鼘幩嵴f明書 1,5-Dicaffeoylquinic acid

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查斯曼林規(guī)格 Chasmanine 組織氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性同位素定量檢測試劑盒20

表大戟二烯醇規(guī)格 Tirucallol 組織氯霉素乙酰基轉(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性同位素薄層色譜(TLC)檢測試劑盒20

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白花前胡丙素規(guī)格（+）-Praeruptorin C 組織絡(luò)氨酸1酸酶(TP)活性比色法定量檢測試劑盒20

α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷說明書 α-spinasteryl-3-O-β-D-glucoside 組織硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20

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