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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BK-P63994 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
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銅綠假單孢菌(PA）/綠膿桿菌 PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63994 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISAKit ELISA. 96T/48T Emodin 518-82-1 中文名：大黃素 分子式：C15H10O5 度：99.0% 關(guān)鍵詞： 抗菌; ; 導(dǎo)瀉; 酸模屬; 大黃屬; 決明屬; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠牙本質(zhì)涎0蛋白 英文名稱： Mouse Dein Sialophosphoprotein 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： DSP Myricadenin A 中文名： 分子式：C39H40O17 度：97.5%
小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Mefenamic acid 61-68-7 中文名：甲滅酸 分子式：C15H15NO2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
小鼠血小板源生長因子-BB 英文名稱： plateler-derived growth factor BB 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： PDGF-BB m-Nitrohydrocinnamic acid 1664-57-9 中文名： 分子式：C9H9NO4
小鼠血小板因子elisa試劑盒 小鼠血小板因子試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠血小板因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板因子試劑盒、小鼠血小板因子elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。 N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide 42137-88-2 中文名：N,N-雙(2-氯乙基)對甲苯磺酰胺 分子式：C11H15Cl2NO2S
3T3L1細(xì)胞，小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(前脂肪) 癌細(xì)胞,ER-30細(xì)胞 體外管腔形成分析試劑盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)
非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC)
IL25 Others Human IL25 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 4,5-去亞異丙基托吡酯4,5-Desisopropylidene Topiramate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM-prfR-羥基托吡酯R-Hydroxy Topiramate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) S-羥基托吡酯S-Hydroxy
Topiramate質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口
大額牛肺細(xì)胞;BFR-L1硝酸奧昔康唑（標(biāo)準(zhǔn)品）Oxiconazole
Nitrate質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
Ishikawa, 內(nèi)膜癌細(xì)胞系普瑞巴林（標(biāo)準(zhǔn)品）Pregabalin質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
細(xì)胞;SF767 大鼠腮腺細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林雜質(zhì)）（標(biāo)準(zhǔn)品）[(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
腎系膜細(xì)胞生長添加物MCGS山梨醇（標(biāo)準(zhǔn)品）D-Sorbitol質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 乙二醇（標(biāo)準(zhǔn)品）Ethylene Glycol質(zhì)量規(guī)格：供檢查用
20-Hydroxyecdysone 中文名：20-羥基蛻皮甾酮 分子式：C27H44O7 固（ALD） 96T/48T
2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate 中文名： 分子式：C11H13F3O5S 基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9） 96T/48T
2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 中文名： 分子式：C12H14O3S 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1） 96T/48T
2-[(6-Chloro-3,4-dihydro-3-methyl-2,4-dioxo-1(2H)-pyrimidinyl)methyl]benzonitrile 中文名： 分子式：C13H10ClN3O2 緊張素Ⅱ一型受體抗原 英文名稱： Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen 英文縮寫： AT1R 規(guī)格： 48T/96T
2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol 中文名： 分子式：C11H14O5 素‖受體︱型自身抗體 英文名稱： Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies 英文縮寫： AT1R-AA 規(guī)格： 48T/96T
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。
銅綠假單孢菌(PA）/綠膿桿菌 PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
