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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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EHA105 感受態(tài)細胞
起訂量 (瓶)價格
1-10￥2350 /瓶
≥10￥1250 /瓶
  • 品牌：帛科
  • 產(chǎn)地：進口、國產(chǎn)
  • 貨號：BK-G63302
  • 發(fā)布日期： 2021-02-21
  • 更新日期： 2024-12-24
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 BK-G63302
用途 產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 詳見說明書
細胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細胞 否
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源 詳見說明書
包裝規(guī)格 100ul*10 100ul*50　100ul*100
純度 %
是否進口 是

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

規(guī)格參數(shù)：

產(chǎn)品名稱：EHA105 感受態(tài)細胞
規(guī)格 ：100ul*10 100ul*50 100ul*100
分類：根癌農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞
用途：生化試劑（用于科研試驗研究）
儲存條件: -70℃保存，必須加干冰運輸。自收貨之日起液氮保存至少一年，-70℃保存至少6個月。
外觀:（性狀） 干冰運輸，單加10kg干冰費
單位: 袋

注意事項：


1. 感受態(tài)細胞*在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少最終用于涂板的菌量。
同一批感受態(tài)細胞，用含目的片段的T載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)化（陽性對照）能長出密密麻麻的菌落，而用另一種載體和目的片段的連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，卻一個菌都沒長出來，重復(fù)了三次都這樣。請問這是感受態(tài)細胞的制作不過關(guān)，還是連接出了問題？哪個可能性大些？
答：應(yīng)該是連接的問題。所有連接反應(yīng)建議同時轉(zhuǎn)化酶切后的質(zhì)粒作為另一個陰性對照，確定酶切是否完全。同時連接前請確定質(zhì)粒和片段濃度達到最小連接量的要求。
感受態(tài)細胞放到-80冰箱了有半年了，還能用來轉(zhuǎn)化質(zhì)粒嗎？
答：如-80冰箱儲存過程中沒有發(fā)生凍融的情況，是可以用來轉(zhuǎn)化的，但是由于凍存時間過長，轉(zhuǎn)化效率會有所下降，如果用于普通的質(zhì)粒重轉(zhuǎn)或TA克隆等高效連接體系也是可以的，如珍貴的樣品請選用較為新鮮的感受態(tài)細胞。

蕓苔素內(nèi)酯(標準品)Brassinolide質(zhì)量規(guī)格：分析標準品  小鼠絲酸/蘇酸蛋酸酶(STK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  ELISAKitOPGL小鼠骨保護素配體規(guī)格：48T/96T

啶蟲脒(標準品)Acetamiprid質(zhì)量規(guī)格：分析標準品  Rat myosin (Myosin) ELISA Kit 大鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA試劑盒  Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甲巰咪唑（標準品）Methimazole質(zhì)量規(guī)格：含量測定  Humanneuraminidase,NAELISAKit 人神經(jīng)氨酸酶(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝  人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

枸櫞酸氯米芬（標準品）Clomiphene 質(zhì)量規(guī)格：含量測定  Duckai-prothrombinsaibodies,aPT1/aPT2ELISA試劑盒鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒 Mouse Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA kit

小鼠周期素依賴性激酶8(CDK8)ELISA試劑盒 ，英文名： CDK8 ELISA Kit  62-46-4硫辛酸說明書  Lipoic acid

犬維生素E(VE)ELISA檢測試劑盒CanineVitaminE,VEELISAKit 96T/48T  20831-76-9龍膽苦苷品牌  Gentiopicroside

犬透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 Canine Hyaluronic acid,HA ELISA Kit  153-18-4蘆丁規(guī)格  Rutin

英文名稱HumaumornecrosisfactorαELISAKIT人α(TNFα)ELISAKIT規(guī)格：96T/48T  481-72-1蘆薈大黃素  Aloeemodin

超氧化物歧化酶(SOD)細胞裂解樣品制備試劑盒50  1415-73-2蘆薈苷說明書  Aloin

529-44-2楊梅素  Myricetin  豬壞死因子α(TNF-α)試劑盒 Porcine TNF-α ELISA Kit

5289-74-7蛻皮激素  Ecdysterone  豬壞死因子α(TNF-α)ELISA檢測試劑盒Porcinetumornecrosisfactorα,TNF-αELISAKit 96T/48T

528-58-5氯化矢車菊素規(guī)格  Cyanidin Chloride  豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA檢測試劑盒PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 96T/48T

528-48-3漆黃素品牌  Fisetin   豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)ELISA檢測試劑盒PorcinelisteriolysinELISAKit 96T/48T

528-43-8厚樸酚規(guī)格  Magnolol   豬腸三葉因子(ITF)ELISA檢測試劑盒PorcineIestinalefoilfactor,ITFELISAKit 96T/48T

EHA105 感受態(tài)細胞操作方法：

1. DH5α感受態(tài)細胞從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質(zhì)?；蜻B接產(chǎn)物）并用手撥打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

聯(lián)系方式
手機：13564080845