產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64001 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50T |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
沙門氏菌SPP-glgcPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P64001 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N-[2-Isopropylthiazol-4-ylmethyl(methyl)carbamoyl]-L-valine 154212-61-0 中文名: 分子式:C14H23N3O3S
小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine 中文名:N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒 分子式:C14H22N4O4 度:98.0%
小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 N,N'-Di-Boc-1H-pyrazole-1-carboxamidine 中文名:N,N'-二叔丁氧羰基-1H-吡唑-1-甲脒 分子式:C14H22N4O4
小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estra-4,9-diene-3,17-dione 5173-46-6 中文名:甲基雙烯雙酮 分子式:C18H22O2
小鼠樣生長因子elisa試劑盒 小鼠樣生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠樣生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠樣生長因子試劑盒、小鼠樣生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Monobenzone 103-16-2 中文名:莫諾苯宗 分子式:C13H12O2
CM-H062腎管狀上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mLN-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRN-Acetyl-cysteine
Hep-2, 細(xì)胞系 *瘤,45.6.TG1.7細(xì)胞 Hs888Lu()佐匹克隆質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076蘋果酸舒尼替尼質(zhì)量規(guī)格:>99.0%,BRSunitinib Malate
CD74 Others Human CD74 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 蘋果酸舒尼替尼(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Sunitinib Malate
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM9803舒洛芬質(zhì)量規(guī)格:>98%Suprofen
大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL反式白藜蘆醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸trans Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
NAMALWAButt's瘤細(xì)胞 NAMALWA human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS反式白藜蘆醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸trans Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
FGF14 Protein Canine 重組狗 FGF14 / SCA27 蛋白利巴韋林5'-三1酸鈉鹽Ribavirin 5'-Triphosphate salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 平滑肌細(xì)胞HBVSMC利巴韋林5'-二1酸鋰鹽Ribavirin 5'-Diphosphate Lithium Salt質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞cDNAHBdSF cDNAα-利巴韋林(利巴韋林雜質(zhì)B)α-Ribavirin
(Ribavirin Impurity B)質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
2-Aminofluorene
中文名:2-氨基芴 分子式:C13H11N 載脂蛋白 E(APO E) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-9H-fluoren-9-one 中文名:2-氨基-9H-芴-9-酮 分子式:C13H9NO 抗激素 (AVP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-6-methylbenzothiazole 中文名:2-氨基-6-甲基苯并噻唑 分子式:C8H8N2S 內(nèi)皮抑素 (Endostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-6-ethoxybenzothiazole 中文名:2-氨基-6-乙氧基苯并噻唑 分子式:C9H10N2OS 內(nèi)皮素 -1(Endothelin-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Amino-6-chloropurine 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5 內(nèi)啡肽 - b (Endorphin- b ) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
沙門氏菌SPP-glgcPCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。